BioPro IEX系列是針對(duì)蛋白、核酸等生物醫(yī)藥品純化與分析而開(kāi)發(fā)的離子交換色譜柱。該系列產(chǎn)品采用非特異性吸附極低的親水聚合物為基質(zhì),鍵合強(qiáng)陰/陽(yáng)離子官能團(tuán)而成。既有非常適于生物醫(yī)藥品(如抗體類)特征解析及品質(zhì)管理等要求的高分離能力的無(wú)孔類型色譜柱,亦有適于實(shí)驗(yàn)室級(jí)別純化的高分離、高吸附量的多孔型色譜柱。同時(shí)備有用于初期及中期制備的離子交換填料。
要點(diǎn)
規(guī)格一覽 | 強(qiáng)陰離子交換色譜柱 BioPro IEX QF | 強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱 BioPro IEX SF | 強(qiáng)陰離子交換色譜柱 BioPro IEX QA | 強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱 BioPro IEX SP |
基質(zhì) | 親水性五孔聚合物 | 親水性多孔聚合物 | ||
顆粒徑(μm) | 3,5 | 5 | ||
離子交換官能團(tuán) | -CH2N+(CH3)3 | -CH2CH2CH2SO3- | -CH2N+(CH3)3 | -CH2CH2CH2SO3- |
出廠時(shí)的對(duì)離子 | Cl- | Na+ | Cl- | Na+ |
離子交換容量(meq/mL-resin) | 0.075-0.11 | 0.23-0.29 | 0.075-0.1 | 0.07-0.095 |
動(dòng)態(tài)吸附容量(mg/mL-resin) | DBC>12 (BSA) | DBC>10 (human-lgG) | DBC>110 (BSA) | DBC>70 (human-lgG) |
適用溫度范圍 | 4-60℃ | |||
適用pH范圍 | 2.0~12.0 | |||
柱管材質(zhì) | PEEK |
產(chǎn)品特點(diǎn)
| 短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好的分離-單克隆抗體的分析
下圖為使用BioPro IEX SF與市面上銷售的色譜柱在pH 5.6的相同梯度條件下對(duì)單克隆抗體分離的比較譜圖。
與市面上銷售的色譜柱相比,BioPro IEX SF分離時(shí)間短且峰形尖銳,分離效果更佳。
Eluent | 20 mM MES-NaOH (pH 5.6) 20 mM MES-NaOH (pH 5.6) containing 0.2 M NaCl |
Initial gradient conc. | 35%B (70 mM NaCl) |
Gradient slope | 0.25%B/min (0.5 mM NaCl) |
Flow rate | 180 cm/hr (0.5 mL/min for 100 X 4.6 mmI.D. 0.378 mL/min for 250 X 4.0 mmI.D.) |
Temperature | 30℃ |
Detection | UV at 280 nm |
Injection | 10 μL |
Sample | Humanized monoclonal IgG1 (1 mg/mL) |
| 卓越的再現(xiàn)性~單克隆抗體的分析
下圖顯示了BioPro IEX SF的批次再現(xiàn)性。
每一批次的填料均有很高的分離能力,并展現(xiàn)出卓越的批次間再現(xiàn)性,因此非常適用于注重批次再現(xiàn)性的生物醫(yī)藥品的品質(zhì)管理。
Column | BioPro IEX SF 5 μm, 100 X 4.6 mmI.D. |
Eluent | 20 mM NaH2PO4-Na2HPO4 (pH 6.5) 20 mM NaH2PO4-Na2HPO4 (pH 6.5) containing 0.2 M NaCl 0-50%B (0.5-30 min) |
Flow rate | 0.5 mL/min (180 cm/hr) |
Temperature | 25℃ |
Detection | UV at 215 nm |
Injection | 10 μL |
Sample | monoclonal antibody (IgG1) |
| 適于超高速分析的30mm柱長(zhǎng)的無(wú)孔色譜柱
從無(wú)孔型色譜柱與多孔型色譜柱對(duì)蛋白質(zhì)的分離比較中可以看出,BioPro IEX色譜柱中的無(wú)孔型基質(zhì)具有優(yōu)秀的機(jī)械強(qiáng)度,可通過(guò)提高流速進(jìn)行快速分析達(dá)到提高柱分析效率的目的。
Eluent | 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) containing 0.5 M NaCl 0-100%B (0-4 min) for BioPro IEX SF 0-100%B (0-60 min) for BioPro IEX SP |
Temperature | 25℃ |
Detection | UV at 220 nm |
Injection | 20 μL |
| 高動(dòng)態(tài)吸附容量&高回收率
BioPro IEX色譜柱中的有孔型色譜柱是一款將非特異性吸附降低到很小的親水性聚合物為基質(zhì)的離子交換色譜柱,因有易于與蛋白質(zhì)進(jìn)行相互作用的表面構(gòu)造,因此對(duì)蛋白質(zhì)展示出很高的動(dòng)態(tài)吸附容量與高回收率。
BSA的動(dòng)態(tài)吸附容量及回收量
動(dòng)態(tài)綁定容量 (mg/mL-resin, 10% breakthrough) | 洗脫量 (mg/mL-resin) | 回收率 (%) | |
BioPro IEX QA | 126 | 120 | 95 |
A社 (porous Q type) | 73 | 58 | 79 |
B社 (porous Q type) | 100 | 35 | 35 |
Column | BioPro IEX QA 50 X 4.6 mmI.D. (porous Q Type) 50 X 4.6 mmI.D. (porous Q Type) 50 X 5.0 mmI.D. |
Linear velocity | 180 cm/hr |
Sample | 1 mg/mL Bovine serum albumin (BSA) inequilibration buffer |
Equilibration buffer | 20 mM Tris-HCl (pH 8.6) |
Elution buffer | 20 mM Tris-HCl (pH 8.6) containing 1.0 M NaCl |
Detection | UV at 280 nm |
| 即使高載樣量條件下仍維持高分離性能的高吸附能力
對(duì)于市售色譜柱即使載樣量不大時(shí),也常常存在峰形差分離不佳的情況。而B(niǎo)ioPro IEX QA即使在高載樣量的情況下也顯示出良好的峰形,可用于那些希望提高上樣量以便于檢測(cè)小峰的情況。同時(shí),由于具有很高的回收率,因此也適用于小規(guī)模的純化制備。
Eluent | 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) containing 0.5 M NaCl 10-80%B (0-30 min) |
Flow rate | 0.5 mL/min |
Temperature | 25℃ |
Detection | UV at 280 nm |
Injection | 100 μL |
填料 | 顆粒徑 (μm) | 孔徑 | 柱尺寸 內(nèi)徑×柱長(zhǎng) (mm) | 產(chǎn)品型號(hào) |
BioPro IEX QA | 5 | porous | 4.6 X 30 | QAA0S05-0346WP |
4.6 X 50 | QAA0S05-0546WP | |||
4.6 X 100 | QAA0S05-1046WP | |||
BioPro IEX SP | 5 | porous | 4.6 X 30 | SPA0S05-0346WP |
4.6 X 50 | SPA0S05-0546WP | |||
4.6 X 100 | SPA0S05-1046WP | |||
BioPro IEX QF | 3 | non-porous | 4.6 X 30 | QF00S03-0346WP |
4.6 X 50 | QF00S03-0546WP | |||
4.6 X 100 | QF00S03-1046WP | |||
5 | non-porous | 4.6 X 30 | QF00S05-0346WP | |
4.6 X 50 | QF00S05-0546WP | |||
4.6 X 100 | QF00S05-1046WP | |||
BioPro IEX SF | 3 | non-porous | 4.6 X 30 | SF00S03-0346WP |
4.6 X 50 | SF00S03-0546WP | |||
4.6 X 100 | SF00S03-1046WP | |||
5 | non-porous | 4.6 X 30 | SF00S05-0346WP | |
4.6 X 50 | SF00S05-0546WP | |||
4.6 X 100 | SF00S05-1046WP |