近日，據(jù)國家藥監(jiān)局藥審中心官網顯示，邦耀生物靶向CD19基因修飾的異體嵌合抗原受體T細胞注射液（代號：BRL-301）已獲得臨床試驗默示許可，針對適應癥為急性淋巴細胞白血病。

       BRL-301是由邦耀生物利用具有自主知識產權的TyUCell平臺開發(fā)，是一款通用型異體CAR-T產品，也是國內進展最快的基因編輯通用型CAR-T產品管線之一。

       近年來，作為全球最火熱的細胞免疫治療技術之一，圍繞CAR-T的研發(fā)呈現(xiàn)井噴之勢。雖然CAR-T產品陸續(xù)上市，但基本均為自體CAR-T產品，個體化生產的特質決定了目前的CAR-T產品成本極高，因此定價也水漲船高。如復星凱特的阿基侖賽注射液定價120萬元/支，藥明巨諾的瑞基奧侖賽注射液129萬元/支。

       因此，不論是患者、醫(yī)療機構、監(jiān)管機構還是藥企，都希望提高患者的用藥可及性。開發(fā)通用型平臺技術，便成為了提高CAR-T藥物可及性的一種方式，也是當前CAR-T領域競爭的一大焦點。

       那么什么是通用型CAR-T？目前研發(fā)進展到哪一步了？面臨的挑戰(zhàn)和瓶頸有哪些？

       PART.01

       通用型CAR-T簡介

       CAR-T（即嵌合抗原受體T細胞）療法，是指通過基因修飾技術，將帶有特異性抗原識別結構域及T細胞激活信號的遺傳物質轉入T細胞，使T細胞直接與腫瘤細胞表面的特異性抗原相結合而被激活，通過釋放穿孔素、顆粒酶素B等直接殺傷腫瘤細胞，同時通過釋放細胞因子，募集人體內源性免疫細胞殺傷腫瘤細胞，達到治療腫瘤的目的。由于還可形成免疫記憶T細胞，因此可獲得特異性的抗腫瘤長效機制。

       目前，獲FDA批準上市的CAR-T療法均為自體CAR-T療法。它們是從患者體內獲取T細胞，于體外通過基因工程技術在T細胞表面表達針對癌癥抗原的嵌合抗原受體（CAR），然后將增殖后的細胞輸回患者體內。這一生產過程可能需要耗時長達3周，成本高昂。另外，一些患者可能由于自身免疫抑制或放化療影響，導致自體T細胞耗竭、衰老并發(fā)生功能缺陷，最終將影響擴增的CAR-T細胞質量，嚴重影響臨床療效，導致他們不能從這一突破性技術中獲益。

       通用型CAR-T，又稱異體型CAR-T（英文名：Off-the-shelf或Universal CAR-T，UCAR-T），是指將主要從健康捐獻者體內分離提取的T細胞，通過基因編輯或非基因編輯改造和體外擴增后，最后可輸入多位患者體內的療法。

       圖1. UCAR-T制備流程，來源：Nature Reviews Drug Discovery

       整體而言，相較于自體型CAR-T，UCAR-T無需漫長的制備等待時間，可避免相關治療風險。同時，UCAR-T來源自健康供者，T細胞活性強，還可有效避免腫瘤污染。此外，也是比較重要的一點，UCAR-T的工業(yè)化生產過程可以有效降低成本和治療費用，降低患者醫(yī)療負擔，增加可及性。因此，UCAR-T技術或許將是腫瘤細胞療法的未來。

       PART.02

       UCAR-T研發(fā)處于早期

       仍面臨諸多挑戰(zhàn)

       理論上來說，UCAR-T產品能完 美地解決患者可及性、可負擔性，可以使個體化的藥物能夠像傳統(tǒng)的藥物一樣廣泛應用。但是目前來看，這個美好的愿景還需要驗證。

       對于UCAR-T研發(fā)來說，目前行業(yè)需要解決的問題集中在免疫排斥方面。在異體CAR-T細胞進入人體后，會出現(xiàn)兩種情況：

       一、異體CAR-T細胞在人體內增殖后，反而把人體內原有組織和細胞當作入侵者，對其進行攻擊。這會導致患者出現(xiàn)移植物抗宿主?。℅vHD），大約20-50%的患者在移植后會出現(xiàn)GVHD，輕則出現(xiàn)皮疹、黃疸，重則危及生命。

       二、人體內的免疫細胞把回輸?shù)漠愺wCAR-T細胞當作是入侵者，產生免疫排斥反應，這就會導致宿主抗移植物排斥反應（HvGA）。

       針對GvHD，目前主要通過ZFNs（鋅指核酸酶）、TALENs（轉錄激活因子樣效應物核酸酶）、CRISPR/Cas9等基因編輯手段，敲除掉TCR的表達，來規(guī)避GvHD的發(fā)生。但是針對HvGA的處理則比較棘手，出現(xiàn)HvGA的原因主要是患者體內的T細胞、NK細胞等免疫細胞，會在識別外源細胞的HLA（人類白細胞抗原）后，對其進行殺傷與清除。因此，會導致UCAR-T細胞療法在患者體內存續(xù)時間較短，直接影響療效。

       通常情況下，采取清淋措施可以減少患者本身的免疫細胞數(shù)量，從而實現(xiàn)HvGA的抑制，但高強度的淋巴細胞耗竭可能會對患者帶來其他的風險，如感染等。另外，采取基因編輯的手段，同樣可以敲除UCAR-T細胞中的HLA，通過破壞UCAR-T細胞上絕 對保守的β2M、阻斷HLA-I類分子的表達可以降低免疫排斥作用。但HLA-I類分子的完全缺失，則會導致患者體內NK細胞的激活，導致NK細胞對外源性的CAR-T細胞更為敏感?？傊?，解決UCAR-T免疫排斥問題仍然長路漫漫。

       目前全球僅上市一款UCAR-T產品。去年12月，全球首 款UCAR-T療法Ebvallo （tabelecleucel）獲歐盟委員會（EC）批準上市，用于治療既往接受過至少一次治療的EB病毒（EBV）相關的移植后淋巴增殖性疾?。‥BV+ PTLD）患者。Ebvallo在歐洲被指定為孤兒藥，享受10年的市場排他性權益。而此前，Ebvallo已被FDA授予治療利妥昔單抗難治性EBV相關淋巴增生性疾病（LPD）的突破性療法資格和孤兒藥稱號。

       Ebvallo由Atara Biotherapeutics公司開發(fā)，可以在三天內為患者提供現(xiàn)成的治療方法。相比于自體細胞療法，Ebvallo具備隨取隨用、低成本和高可及性等優(yōu)勢。在III期臨床試驗中，結果顯示，在38例可評估的患者 [24例SOT(接受固體器官移植) 后，14例HCT(異基因造血細胞移植) 后] 中觀察到ORR（客觀緩解率）為50%。CR（完全緩解率）為26.3%，PR（部分緩解率）為23.7%，TTR（中位緩解時間）為1.1個月。

       圖2. Ebvallo長期生存期數(shù)據(jù)，來源：2021ASH

       PART.03

       全球主要布局企業(yè)

       雖然，UCAR-T研發(fā)面臨種種挑戰(zhàn)，但鑒于其明顯的優(yōu)勢，仍深受全球藥企追捧。國外企業(yè)有Allogene Therapeutics、Cellectis、CRISPR Therapeutics、Precision BioSciences等，國內主要布局企業(yè)有亙喜生物、北恒生物、邦耀生物等。

       表1. 部分在研UCAR-T產品，來源：興業(yè)證券、公開資料

       Allogene

       Allogene Therapeutics成立于2017年，總部位于舊金山南部，是一家處于臨床階段的生物技術公司，旨在通過UCAR-T療法解決自體CAR-T治療實體瘤和血液瘤的局限性。

       Allo-501是由Allogene公司開發(fā)的一款UCAR-T產品。2020年ASCO會議上公布的一項I期臨床研究（n=46）顯示，對于復發(fā)/難治性大B細胞淋巴瘤（LBCL）或濾泡性淋巴瘤（FL）患者，結果顯示，Allo-501在LBCL中的ORR為61.5%，CR為46.2%；在FL患者中，ORR為82.6%，CR為52.2%。試驗中未發(fā)生劑量限制性毒 性、GvHD、2級以上免疫細胞相關的神經系統(tǒng)毒 性綜合征（ICANS）等。

       2021年ASCO年會上，Allogene公司又披露了ALLO-501的升級產品ALLO-501A（即刪除了ALLO-501中的利妥昔單抗識別域）的研究數(shù)據(jù)，結果顯示，其在復發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤患者中具有良好的安全性和療效，12例可評估的患者總體ORR和CR均為50%，未發(fā)生GvHD、ICANS。

       Cellectis

       Cellectis作為通用細胞療法領域的領航者之一，其擁有20余年的基因編輯經驗。UCART22是Cellectis研發(fā)的一款基于TALEN基因編輯的UCAR-T候選產品，靶向CD22，旨在治療復發(fā)和難治性B細胞急性淋巴細胞白血病和非霍奇金淋巴瘤。目前，該療法正在進行I/II期研究。

       UCART123是Cellectis研發(fā)的另一款UCAR-T產品，它利用TALEN技術，對T細胞進行基因編輯，使之特異性識別CD123抗原，旨在治療急性髓細胞性白血病等。目前正在進行一項I期劑量遞增研究。

       Precision BioSciences

       Precision BioSciences成立于2006年，總部位于美國北卡羅來納州，它致力于利用獨有的ARCUS基因組編輯技術，開發(fā)UCAR-T療法。

       PBCAR0191是Precision BioSciences研發(fā)的首 款UCAR-T產品，利用其獨有的ARCUS基因編輯技術，敲除異體CAR-T細胞中編碼TCR的基因，以避免移植物抗宿主病。

       2022年6月，Precision BioSciences公布了PBCAR0191的I期臨床試驗結果，數(shù)據(jù)顯示，在接受過自體CAR-T療法治療后復發(fā)的彌漫性大B細胞淋巴瘤（DLBCL）患者中，PBCAR0191達到100%客觀緩解率，73%完全緩解率，50%的患者緩解持續(xù)時間超過6個月。目前PBCAR0191正在進行II期臨床研究。

       亙喜生物

       亙喜生物是一家致力于發(fā)現(xiàn)和開發(fā)突破性細胞療法的全球臨床階段生物制藥公司。利用其開創(chuàng)性FasTCAR及TruUCAR兩大突破性技術平臺，以及SMART CART技術模塊，亙喜生物正在開發(fā)多項自體和同種異體的臨床階段癌癥治療產品管線。

       GC007g是亙喜生物旗下的一款靶向CD19的供者來源異基因CAR-T細胞療法，用于治療接受過同種異體干細胞移植后復發(fā)的B淋巴細胞白血?。╮/r B-ALL）患者。在I期臨床試驗階段，GC007g的有效性及安全性方面都取得了令人鼓舞的數(shù)據(jù)。

       小結

       整體來看，UCAR-T在細胞制備、質控、臨床給藥方面簡化了細胞治療的復雜程度，同時也可以在很大程度上降低CAR-T療法的生產成本，但是，其技術的復雜程度也隨之水漲船高。目前UCAR-T還面臨著療效、持久性、副作用等問題。不過隨著針對UCAR-T面臨挑戰(zhàn)的攻克方案逐漸完善，一系列UCAR-T產品也依靠獨特的技術平臺在臨床前與臨床試驗中嶄露頭角。

       CAR-T療法的探索永無止境，沒人能夠判斷CAR-T療法的未來會是什么樣，天花板又有多高。但開發(fā)UCAR-T趨勢已成，一旦其在臨床試驗中能夠證實其安全性和有效性，該療法的廣泛應用必將接踵而至。最終誰將是細胞與基因療法領域的“Game Changer”，我們拭目以待。

       參考資料：

       1.‘Off-the-shelf’allogeneic CAR T cells:development and challenges. https://doi.org/10.1038/s41573-019-0051-2.

       2. Muthuvel M, Srinivasan H, Louis L et al. Engineering off-the-shelf universal CAR T cells: A silver lining in the cloud. Cytokine. 2022 Aug;156:155920.

       3. Abou-El-Enein M, Elsallab M, Feldman SA et al. Scalable Manufacturing of CAR T cells for Cancer Immunotherapy. Blood Cancer Discov. 2021 Sep;2(5):408-422.

       4. https://www.biospace.com/article/releases/cellectis-presents-first-preclinical-data-on-ucartmeso-an-allogeneic-car-t-cell-product-candidate-targeting-mesothelin-to-treat-solid-tumors-at-the-annual-meeting-of-the-society-for-immunotherapy-of-cancer/.

       5. 各企業(yè)官網

       專欄作者

       小時光

       生化與分子生物學背景，曾從事食管鱗癌的分子分型工作，熟悉各實體瘤的發(fā)病機制和用藥方案?，F(xiàn)以發(fā)現(xiàn)和傳播知識為謀生手段，學無止境，希望自己永遠保持謙虛的心態(tài)和可塑性，和各位同道一起迎接醫(yī)藥領域的黃金時代。