10月29日，安進(jìn)（Amgen）的雙特異性抗體倍林妥莫雙抗（Blinatumomab，商品名Blincyto）在我國(guó)提交了上市申請(qǐng)。受理號(hào)JXss1900060。這一CD3，CD19雙特異性抗體在2014年和2015年底分別獲得了美國(guó)FDA和歐洲EMA批準(zhǔn)，用復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞急性淋巴性白血?。ˋLL）。

       Blinatumomab是全球第二個(gè)獲批的雙特異性抗體抗腫瘤藥物。有趣的是，它也是全球首個(gè)已上市的，在臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中使用PBMC免疫系統(tǒng)人源化模型的雙特異性抗體藥物。2003年，實(shí)驗(yàn)人員利用NALM-6(人急性淋巴性B 細(xì)胞白血病細(xì)胞系) 與PBMC共同接種的NOD-SCID小鼠測(cè)試了這一CD3/CD19雙特異性抗體的藥效1。

       圖1：Blinatumomab藥效實(shí)驗(yàn)

       PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型是在早期周齡的重度免疫缺陷小鼠的基礎(chǔ)上，注射從健康成人供體血液中分離的單核細(xì)胞（PBMC），由單核細(xì)胞在小鼠體內(nèi)繼續(xù)分化與增殖為完整的人源免疫系統(tǒng)。其特點(diǎn)是所重建的免疫系統(tǒng)與人體完全保持一致，擁有人免疫系統(tǒng)的所有受體與細(xì)胞亞型。

       如今，PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型已經(jīng)成為國(guó)際上雙特異性抗體研究中最常用的動(dòng)物模型。在利用鼠源同型抗體在小鼠同源模型上驗(yàn)證靶點(diǎn)后，絕大多企業(yè)選擇直接使用PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型進(jìn)行人源抗體的臨床前體內(nèi)藥效實(shí)驗(yàn)。

       圖2：部分雙特異性抗體藥效試驗(yàn)結(jié)果

       目前國(guó)內(nèi)在免疫療法的藥效評(píng)價(jià)中，主要使用基因工程同源模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。基因工程的同源模型是基于小鼠的免疫系統(tǒng)，在小鼠的免疫細(xì)胞上，插入人源序列的PD-1等受體，進(jìn)行的人源化改造。與此類同源模型相比，免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型最大的優(yōu)勢(shì)在于其重建的免疫系統(tǒng)與人完全保持一致：

       1. 轉(zhuǎn)入人源靶點(diǎn)基因工程小鼠構(gòu)建過(guò)程復(fù)雜繁瑣，對(duì)于新靶點(diǎn)的開(kāi)發(fā)，往往容易出現(xiàn)“藥等模型”的情況；而當(dāng)需要轉(zhuǎn)入2個(gè)及以上基因時(shí)，建模難度更是呈幾何級(jí)數(shù)增加。擁有人源免疫系統(tǒng)的PBMC小鼠模型擁有所有人源靶點(diǎn)，可以直接用于各種新老靶點(diǎn)的雙特異性乃至于三特異性抗體的研發(fā)，無(wú)需等待相應(yīng)的基因工程小鼠的漫長(zhǎng)開(kāi)發(fā)周期。

       2. 人的免疫系統(tǒng)和小鼠的免疫系統(tǒng)存在諸多差異，這些差異可能導(dǎo)致臨床前動(dòng)物藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床結(jié)果不一致10。在人免疫系統(tǒng)上進(jìn)行免疫療法研究，能夠更好地預(yù)測(cè)藥物在臨床治療中的藥效。

       3. PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型可以接種人源細(xì)胞系及PDX模型用于免疫療法藥效評(píng)價(jià)，與鼠源細(xì)胞系（30-40種）相比，擁有更靈活的選擇空間。

       圖3：小鼠免疫系統(tǒng)與人免疫系統(tǒng)的差異

       過(guò)去，PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠應(yīng)用于腫瘤免疫療法新藥研發(fā)的最主要挑戰(zhàn)在于：

       1. PBMC小鼠模型存在移植物抗宿主反應(yīng)（GVHD）。一般來(lái)說(shuō)，小鼠會(huì)在PBMC接種后2-4周出現(xiàn)致死性移植物抗宿主反應(yīng)(GVHD)癥狀，給藥窗口期過(guò)短引發(fā)，無(wú)法滿足藥效實(shí)驗(yàn)的需求；

       2. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施管控不嚴(yán)格，機(jī)會(huì)致病菌污染無(wú)法消除，導(dǎo)致的免疫缺陷動(dòng)物免疫泄露引起實(shí)驗(yàn)接種PBMC后無(wú)法穩(wěn)定重建人源免疫系統(tǒng)；

       3. 僅有60%的健康成人供體提供的PBMC可以在免疫缺陷動(dòng)物中重建起人的免疫系統(tǒng)。

       菲諾克生物科技獨(dú)特的PBMC平臺(tái)目前已經(jīng)完全克服了PBMC小鼠模型的這兩個(gè)主要障礙：

       1. 菲諾克自主開(kāi)發(fā)的NPSG小鼠及PBMC重建技術(shù)，可以確保GVHD平均發(fā)生時(shí)間延遲至7周后，提供充足的藥效學(xué)研究窗口；

       2. 通過(guò)使用特有的平臺(tái)技術(shù)對(duì)PBMC供體的流式及體內(nèi)預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選，菲諾克生物科技能夠向研發(fā)客戶確保實(shí)驗(yàn)中人源免疫系統(tǒng)100%重建成功；

       3. 菲諾克擁有全國(guó)最高隔離級(jí)別的SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施，以及最嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)設(shè)施管控，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施建成至今未發(fā)生一起微生物污染事故。

       圖4：菲諾克不同批次PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠建模數(shù)據(jù)：體重?cái)?shù)據(jù)，PBMC接種后7周后未發(fā)現(xiàn)包括體重下降在內(nèi)的GVHD癥狀；免疫系統(tǒng)重建數(shù)據(jù)，hCD45陽(yáng)性細(xì)胞在第二周已開(kāi)始重建，第三周后均能達(dá)到20%以上。菲諾克確保所有使用的PBMC供體提前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選，排除不能重建、重建不穩(wěn)定及GVHD出現(xiàn)較早的供體，只使用重建效果好的PBMC供體為客戶進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

       與其他類型的動(dòng)物模型相比（如CD34+HSC免疫系統(tǒng)人源化小鼠，基因工程同源小鼠模型等），菲諾克生物科技提供的PBMC免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型擁有更高的性價(jià)比，能夠在提升雙特異性抗體研發(fā)效率的同時(shí)，為新藥研發(fā)企業(yè)節(jié)約寶貴的研發(fā)經(jīng)費(fèi)。菲諾克擁有700+不同癌癥類型的腫瘤細(xì)胞系，可以支持新藥研發(fā)企業(yè)進(jìn)行任意靶點(diǎn)的腫瘤免疫療法新藥開(kāi)發(fā)。

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