2020年10月22日，泛生子（納斯達(dá)克代碼：GTH）宣布與杭州艾沐蒽生物科技有限公司（以下簡(jiǎn)稱“艾沐蒽”）簽訂獨(dú)家許可協(xié)議，獲得其血液腫瘤微小殘留?。⊿eq-MRD）產(chǎn)品的全球獨(dú)家許可，并將加速產(chǎn)品開發(fā)和商業(yè)化。根據(jù)協(xié)議，泛生子將擁有使用艾沐蒽的Seq-MRD®技術(shù)進(jìn)行研發(fā)、注冊(cè)、商業(yè)化血癌MRD檢測(cè)產(chǎn)品的專有權(quán)。

       一、血液腫瘤發(fā)病背景簡(jiǎn)介

       血液腫瘤是一類常見但復(fù)雜的癌癥類型的統(tǒng)稱，主要包括各類白血病、多發(fā)性骨髓瘤以及惡性淋巴瘤，是一類具有高度異質(zhì)性的疾病，對(duì)患者及其家庭都有巨大影響。以骨髓瘤為例，通過誘導(dǎo)化療等治療方案，可使得大約80%的成人患者達(dá)到臨床緩解。在這其中依然會(huì)有約72%的患者出現(xiàn)因免疫逃逸從而導(dǎo)致的疾病復(fù)發(fā)，骨髓移植后10-15年的生存率也僅保持在15%左右[1]。急性淋巴細(xì)胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia, ALL）是成人最常見的急性白血病類型，根據(jù)現(xiàn)行的系統(tǒng)性誘導(dǎo)化療方案，有85~90%的患者會(huì)出現(xiàn)臨床緩解，但這部分患者仍會(huì)存在60~70%的復(fù)發(fā)[2]。相比于兒童急性淋巴細(xì)胞白血病90%的存活率，成人急性淋巴細(xì)胞白血病的預(yù)后并不能令人滿意[3]。

       二、MRD在淋系血液腫瘤臨床診療中的應(yīng)用

       微小殘留病變（Minimal Residue Disease，MRD）是指患者在接受治療后處于臨床緩解期，無臨床癥狀但在體內(nèi)仍然存在腫瘤細(xì)胞的狀態(tài)。MRD狀態(tài)在實(shí)際中被用于指導(dǎo)治療[4]，根據(jù)是否適合骨髓移植[5]和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)情況[6]對(duì)患者進(jìn)行危險(xiǎn)度分層。它還可用于指導(dǎo)臨床研究中的治療決策[7,8]。一項(xiàng)關(guān)于急淋白血?。ˋLL）的研究顯示，MRD陰性與無復(fù)發(fā)生存期延長(zhǎng)4倍，總生存期延長(zhǎng)3倍具有顯著相關(guān)性[6]。加州大學(xué)舊金山分校的醫(yī)學(xué)博士Aaron Logon呼吁必須將治療轉(zhuǎn)向針對(duì)MRD的靶向和消除。MRD陽性亦被美國(guó)FDA認(rèn)可為具有臨床指導(dǎo)意義的指標(biāo)，基于一項(xiàng)涉及706名成人多發(fā)性骨髓瘤（MM）患者國(guó)際研究結(jié)果，美國(guó)FDA最近批準(zhǔn)了針對(duì)MM患者一線治療的CD38靶向單克隆抗體療法[9]。評(píng)估患者接受此治療前和治療后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的MRD水平，發(fā)現(xiàn) MRD陰性與顯著延長(zhǎng)的無進(jìn)展生存期相關(guān)[10]。血液惡性腫瘤的臨床實(shí)踐指南指出，MRD狀態(tài)是臨床結(jié)果和對(duì)治療反應(yīng)的可靠指標(biāo)，并且臨床結(jié)果與診斷為ALL和MM患者經(jīng)clonoSEQ Assay測(cè)量的MRD水平密切相關(guān)。在多發(fā)性骨髓瘤美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（NCCN）指南[11]，IMWG共識(shí)標(biāo)準(zhǔn)和ESMO骨髓瘤臨床實(shí)踐指南[12]中建議在每個(gè)治療階段后使用經(jīng)過驗(yàn)證的分析方法進(jìn)行MRD評(píng)估；急淋白血病NCCN指南建議在完成初始誘導(dǎo)后對(duì)ALL成人患者進(jìn)行MRD檢測(cè)，MRD檢測(cè)的其他時(shí)間點(diǎn)應(yīng)遵循所使用的治療方案。NCCN指南還建議使用MRD檢測(cè)來確定第一次或第二次完全緩解但MRD陽性的患者，應(yīng)使用blinatumomab治療[13]。

       一項(xiàng)Meta數(shù)據(jù)分析研究了14項(xiàng)已發(fā)表的研究成果，其中包括1273名MM患者，并量化了生存結(jié)果與MRD狀態(tài)之間的關(guān)系。發(fā)現(xiàn)MRD陰性與無進(jìn)展生存期和總生存期相關(guān)。MRD檢測(cè)的預(yù)后價(jià)值的證據(jù)適用于所有疾病亞型、年齡、治療方案、檢測(cè)的治療階段和MRD檢測(cè)方法。MRD陰性與中位無進(jìn)展生存期（PFS）相關(guān)，MRD陰性患者的PFS（54個(gè)月）超過MRD陽性患者（26個(gè)月）兩倍時(shí)間[14]。

       三、MRD檢測(cè)技術(shù)方法對(duì)比

       MRD是在分子水平上對(duì)疾病狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè)。在此之前，對(duì)血液腫瘤的復(fù)發(fā)檢測(cè)歷經(jīng)了傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評(píng)估、流式細(xì)胞術(shù)、影像學(xué)評(píng)估以及分子生物學(xué)評(píng)估等階段。無論采用何種方式，在患者接受治療的過程中，都需要對(duì)患者的血液或骨髓樣本進(jìn)行檢測(cè)，了解其中腫瘤細(xì)胞的存在數(shù)量以及類型。能夠識(shí)別出遠(yuǎn)低于5%原始細(xì)胞閾值的殘留病變，是提高風(fēng)險(xiǎn)分類與預(yù)后的關(guān)鍵要素。在這樣狀態(tài)下殘存的腫瘤細(xì)胞數(shù)量很少，且沒有臨床癥狀，所以不易察覺，但腫瘤的復(fù)發(fā)也往往源于此，因此才需要有更加準(zhǔn)確和靈敏的方法對(duì)MRD進(jìn)行檢測(cè)，從而獲知治療的效果和復(fù)發(fā)可能性。

       形態(tài)學(xué)評(píng)估是應(yīng)用時(shí)間最長(zhǎng)的評(píng)估方式，已經(jīng)沿用了一個(gè)多世紀(jì)，但其靈敏度只能維持在約5%，即在每20個(gè)細(xì)胞中檢出1個(gè)白血病細(xì)胞[15]。起步于上世紀(jì)80年代的流式細(xì)胞術(shù)，大幅度的提高了MRD的檢測(cè)靈敏度。例如，通過使用熒光標(biāo)記對(duì)多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)的細(xì)胞進(jìn)行表面標(biāo)記，使其能夠被激光照射時(shí)得以被記錄而獲知其所占比例，與顯微鏡計(jì)數(shù)相比，流式細(xì)胞術(shù)的靈敏度可以提高到10-4~-5之間，即可在10,000-100,000個(gè)細(xì)胞中檢測(cè)到1個(gè)骨髓瘤細(xì)胞[16]，但受限于流式細(xì)胞儀的激光波長(zhǎng)種類和可選的熒光標(biāo)記，樣本的新鮮程度，以及操作人員經(jīng)驗(yàn)與細(xì)胞類型評(píng)價(jià)也具有較強(qiáng)的主觀性，使得其并不容易形成統(tǒng)一的臨床檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。PET-CT是近年來新型的影像學(xué)診斷技術(shù)，其也可應(yīng)用于骨髓瘤等血液腫瘤的影像學(xué)評(píng)估，并已被NCCN所接受[17]，但該技術(shù)的應(yīng)用仍然面臨著靈敏度低，對(duì)身體有輻射性且價(jià)格昂貴等問題，無法成為臨床上廣泛應(yīng)用的監(jiān)測(cè)方法。隨著分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的快速發(fā)展，其應(yīng)用也逐漸擴(kuò)展到了血液腫瘤相關(guān)領(lǐng)域。熒光定量實(shí)時(shí)PCR技術(shù)的不斷完善，使得其已經(jīng)在上世紀(jì)末被逐漸應(yīng)用于MRD的檢測(cè)。根據(jù)其實(shí)驗(yàn)原理，采用PCR技術(shù)的MRD檢測(cè)靈敏度可以達(dá)到10-5~-6，可在10-100萬個(gè)細(xì)胞中檢測(cè)到1個(gè)骨髓瘤細(xì)胞[18]。但PCR技術(shù)只能檢測(cè)已知的序列突變，不能對(duì)未知的基因重組進(jìn)行檢測(cè)和定量白血病細(xì)胞的數(shù)量和來源，使其臨床應(yīng)用也受到很大的局限。

       隨著基因測(cè)序技術(shù)的不斷迭代，目前的二代測(cè)序技術(shù)（NGS）已經(jīng)可以用來對(duì)眾多腫瘤標(biāo)志物panel進(jìn)行高通量檢測(cè)，其應(yīng)用也逐步拓展到血液腫瘤。淋系白血病指的由淋巴系統(tǒng)細(xì)胞（主要為B細(xì)胞和T細(xì)胞）克隆性增殖導(dǎo)致的癌癥，因此可以通過對(duì)TCR和BCR測(cè)序特異性識(shí)別癌細(xì)胞。人體中的T細(xì)胞受體（TCR）是T細(xì)胞特異性識(shí)別和結(jié)合抗原肽MHC的分子結(jié)構(gòu)。在組成TCR的α、β、γ、δ肽鏈中，β鏈中互補(bǔ)決定區(qū)3的多樣性使得T細(xì)胞能夠識(shí)別各種各樣的抗原。而這樣的多樣性是通過體細(xì)胞V（D）J基因重排產(chǎn)生的。由于V，D，J基因片段本身就具有多樣性，在重組過程中，在V-D和D-J的連接去還經(jīng)常有核苷酸隨機(jī)插入與缺失，這就進(jìn)一步增加了肽鏈的多樣性，TCR的總多樣性可高達(dá)1015，而在任一個(gè)人體內(nèi)的多樣性通常為5000萬種。B細(xì)胞受體（BCR）是由兩條重鏈（H）和兩條輕鏈（κ和λ）組成的四聚體，其中重鏈分為可變區(qū)（V區(qū)）、恒定區(qū)（C區(qū)）、跨膜區(qū)及胞質(zhì)區(qū)；輕鏈則只有V區(qū)和C區(qū)。V區(qū)由3個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)（CDR1、CDR2和CDR3）組成，CDR的基因組成和排列順序呈現(xiàn)高度多樣性，在同一個(gè)體內(nèi)，這種多樣性可高達(dá)109~12，從而構(gòu)成容量巨大的BCR庫。對(duì)于血液腫瘤而言，NGS的優(yōu)勢(shì)正好可以匹配免疫系統(tǒng)中數(shù)百萬甚至數(shù)億計(jì)各自不同的B/T細(xì)胞受體基因，從而對(duì)MRD進(jìn)行更加準(zhǔn)確的定量[19]。NGS對(duì)于MRD的靈敏度一直保持在10-6左右，這使得可以對(duì)某些特征性的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行靶向跟蹤，考慮到NGS技術(shù)的不斷平臺(tái)化，其檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性也將大幅提高[20]。在2017/2018版《NCCN急性淋巴細(xì)胞白血病臨床實(shí)踐指南》、2017版《NCCN多發(fā)性骨髓瘤臨床實(shí)踐指南、》2016年版《中國(guó)成人急性淋巴細(xì)胞白血病診斷與治療指南》和2017年版《中國(guó)多發(fā)性骨髓瘤診治指南》中均推薦可使用NGS進(jìn)行MRD檢測(cè)方法。

       四、美國(guó)MRD已獲批產(chǎn)品情況介紹

       2018年9月28日，F(xiàn)DA通過de novo 審批通道授予clonoSEQ 檢測(cè)和商業(yè)化許可，clonoSEQ 可使用骨髓樣本中的DNA檢測(cè)和監(jiān)測(cè)多發(fā)性骨髓瘤（MM）和B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血?。ˋLL）患者的最小殘留疾?。∕RD）。ClonoSEQ 對(duì)血液中的MRD（微小殘留白血?。O敏感，可以檢測(cè)到低每一百萬個(gè)細(xì)胞中至1癌個(gè)細(xì)胞的水平。

       ClonoSEQ是第一個(gè)也是唯一一個(gè)FDA授權(quán)的用于MRD檢測(cè)的體外診斷測(cè)方法。同時(shí)也是第一個(gè)通過免疫測(cè)序技術(shù)獲得批準(zhǔn)的臨床診斷工具。該檢測(cè)方法可對(duì)MRD進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化、準(zhǔn)確和靈敏的測(cè)量，從而使醫(yī)生能夠預(yù)測(cè)患者的預(yù)后，評(píng)估隨時(shí)間推移對(duì)治療的反應(yīng)，在緩解期間監(jiān)測(cè)患者情況并檢測(cè)潛在復(fù)發(fā)可能。

       FDA對(duì)三項(xiàng)之前進(jìn)行的臨床研究（一項(xiàng)273例急性淋巴細(xì)胞白血病，一項(xiàng)正在進(jìn)行的323例多發(fā)性骨髓瘤和一項(xiàng)706例多發(fā)性骨髓瘤）所得樣本進(jìn)行了回顧性分析評(píng)估，認(rèn)可了該檢測(cè)的臨床有效性。對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病患者而言，clonoSEQ可用來評(píng)估在不同疾病負(fù)擔(dān)閾值下的MRD水平，從而顯示MRD水平與無事件生存相關(guān)---即患者在治療后沒有發(fā)生某些并發(fā)癥或事件的時(shí)間長(zhǎng)度。clonoSEQ檢測(cè)結(jié)果為MRD陰性患者的無事件生存率較長(zhǎng)，而MRD檢測(cè)結(jié)果較高的患者無事件生存率較低。對(duì)多發(fā)性骨髓瘤患者而言，clonoSEQ檢測(cè)給出了無進(jìn)展生存時(shí)間與無疾病生存時(shí)間之間的相似關(guān)聯(lián)性。

       ClonoSEQ產(chǎn)品的成功，歸因于Adaptive公司的專有免疫測(cè)序平臺(tái)所積累的用于鑒定和定量惡性細(xì)胞的特定DNA序列的數(shù)據(jù)庫，以及檢測(cè)結(jié)果與臨床結(jié)果的關(guān)聯(lián)性的驗(yàn)證。

       五、Seq-MRD®未來臨床應(yīng)用潛力巨大

       中國(guó)血液腫瘤MRD的潛在市場(chǎng)非常廣闊，僅2017年，新增確診的淋系血液腫瘤患者約為13.5萬人，其中NHL患者超過8萬例，ALL和CLL患者約3.5萬例， MM患者約2萬例。假設(shè)新發(fā)患者平均每年檢測(cè)4次，每次價(jià)格3000元人民幣，則潛在市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)16億人民幣。而存量患者的潛在市場(chǎng)則更大，據(jù)悉，淋系血液腫瘤存量患者人數(shù)為新增患者的2-4倍[22]。假設(shè)存量患者平均每年檢測(cè)2次，潛在市場(chǎng)規(guī)?？筛哌_(dá)16-32億人民幣。Seq-MRD有望成為這些患者的標(biāo)準(zhǔn)MRD檢測(cè)。

       泛生子與艾沐蒽此次合作推出的Seq-MRD®是基于二代高通量測(cè)序技術(shù)(NGS)，目前國(guó)內(nèi)自主開發(fā)的唯一一款血液腫瘤微小殘留病(MRD)檢測(cè)產(chǎn)品，靈敏性可達(dá)10-6，相比傳統(tǒng)的MRD檢測(cè)方法，Seq-MRD®檢測(cè)靈敏度提高10-100倍。在過去幾年中，Seq-MRD®已經(jīng)在國(guó)內(nèi)完成數(shù)千例臨床樣本的驗(yàn)證。Seq-MRD®可適用于對(duì)血液腫瘤，如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等殘留腫瘤細(xì)胞的識(shí)別、評(píng)估與監(jiān)控。輔助臨床醫(yī)生預(yù)測(cè)長(zhǎng)期療效、評(píng)估治療效果、監(jiān)測(cè)緩解狀態(tài)以及檢測(cè)早期復(fù)發(fā)，從而為患者量身定制精準(zhǔn)化的治療方案，以實(shí)現(xiàn)全階段癌癥管理，提高患者臨床療效并降低醫(yī)療成本。

       泛生子是中國(guó)的癌癥精準(zhǔn)醫(yī)療公司，專注于癌癥基因組學(xué)研究和應(yīng)用，并致力于依托先進(jìn)的分子生物學(xué)及大數(shù)據(jù)分析能力改變癌癥診療方式。致力于提供多應(yīng)用場(chǎng)景的一站式分子診斷解決方案，包括癌癥早期篩查、診斷與監(jiān)測(cè)以及藥物研發(fā)服務(wù)。

       艾沐蒽是中國(guó)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)研究前沿的生物科技公司，自主研發(fā)的免疫分析醫(yī)學(xué)平臺(tái)可揭示和翻譯適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的遺傳密碼，并致力于將其測(cè)序技術(shù)應(yīng)用于癌癥、自身免疫性疾病、傳染性疾病等免疫介導(dǎo)性疾病的診斷和治療中。

       本次戰(zhàn)略整合將進(jìn)一步擴(kuò)展泛生子在腫瘤診斷和監(jiān)測(cè)領(lǐng)域的產(chǎn)品規(guī)劃與布局，實(shí)現(xiàn)臨床腫瘤患者不同檢測(cè)需求的全覆蓋，充分利用泛生子在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)、注冊(cè)和商業(yè)化的優(yōu)勢(shì)，結(jié)合艾沐蒽的既往血癌產(chǎn)品及數(shù)據(jù)積累的優(yōu)勢(shì)。Seq-MRD®檢測(cè)產(chǎn)品能夠?yàn)槟壳把耗[瘤的患者提供更加精細(xì)化的臨床診斷和治療管理。據(jù)悉，泛生子計(jì)劃推動(dòng)Seq-MRD®檢測(cè)產(chǎn)品的注冊(cè)申報(bào)工作，獲批后將會(huì)為血液腫瘤患者提供更加精細(xì)化的臨床診斷和治療管理，使患者更快的從技術(shù)創(chuàng)新中獲益。

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