把手套摘了!”
我戴好PE手套,插好槍頭,正準(zhǔn)備取樣,師姐迎面走了過來喊道。
我一愣,畢竟連配制75%乙醇和培養(yǎng)基,我們都可以戴手套的。但還是很利落地摘了手套,師姐繼續(xù)說道:“記住,除了超凈工作臺(tái)里的要戴手套,這個(gè)實(shí)驗(yàn)室里所有的移液槍都不能戴手套拿。移液槍使用規(guī)定第一條:必須裸手!”
上面場景發(fā)生在我大四畢業(yè)設(shè)計(jì)時(shí),聽上去很奇葩的規(guī)定,但很現(xiàn)實(shí)。原因無他,要確保移液槍是干凈未受污染的。這里的干凈不包括裸手上的汗液,特異性的針對(duì)各種試劑或者生物活性物質(zhì)。當(dāng)然,現(xiàn)在都已經(jīng)要求必須戴好手套來操作了,上述場景已經(jīng)過了十幾年,早已不復(fù)存在。
當(dāng)時(shí)移液槍是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)小型手持式設(shè)備里的頭牌,貴且少,各個(gè)規(guī)格僅有兩套。一套在超凈工作臺(tái),一套在普通環(huán)境下正對(duì)門的桌上掛著,這個(gè)位置可以保證做到日常監(jiān)控,畢竟那會(huì)還沒安裝監(jiān)控?cái)z像頭。
裸手持槍其實(shí)也是無奈之舉,一方面移液槍沒法像其他瓶瓶罐罐那樣泡水清洗,另一方面PE手套的數(shù)量有限,無法保證每個(gè)人都能無限供應(yīng)。而作為跑電泳條帶、EB染色用的必備設(shè)備,移液槍又不可或缺。EB又稱溴化乙錠,是跑電泳后染色的試劑,有著基因**,大家都避之不及。有個(gè)專門能拍照的熒光裝置,可以用電腦操作。那個(gè)鍵盤和鼠標(biāo)本來也是必須裸手操作的,但直到后面有個(gè)師兄摸完膠,直接帶著手套全程操作了拍照,自此鼠標(biāo)和鍵盤也就改了操作的規(guī)定。
至于其他的移液裝置,比如膠頭滴管,只能用來做革蘭氏染色等不用精準(zhǔn)的事。倒是有刻度吸管,從0.1毫升規(guī)格到50毫升的都有。當(dāng)然19世紀(jì)到20世紀(jì)初,還有不少人是用嘴吮吸移液,但我們那個(gè)時(shí)代已經(jīng)禁止用嘴去吸了,改用橡膠洗耳球配合刻度吸管。對(duì)于操作不熟練的人而言,還是極容易把液體吸到洗耳球中。盡管在吸管后方會(huì)加入一團(tuán)脫脂棉來防止污染,但效果不佳。
而且捏洗耳球也會(huì)累手,當(dāng)一個(gè)常用的設(shè)備非常依賴個(gè)人經(jīng)驗(yàn),那必定不人性化。也有老師用另一種類似緩沖管的原理來防止污染,就是在洗耳球和刻度吸管中間連一根透明膠管,如果一不小心倒吸超過了刻度吸管量程范圍,理論上只要膠管足夠長,那液體必定不會(huì)到達(dá)洗耳球中。具體膠管的長度,以洗耳球的體積為準(zhǔn),比如洗耳球的體積是40毫升,那么向膠管里加水40毫升,量出長度,這段長度就可以保證絕對(duì)安全。
為什么對(duì)洗耳球要這么重視?
因?yàn)橄炊蚝涂潭任芤粯佣际侵貜?fù)使用的,洗耳球口小肚子大,一旦倒吸進(jìn)洗耳球,要清洗干凈是非常難的。再使用時(shí)極有可能交叉污染,而避免污染和交叉污染是試驗(yàn)成功的基礎(chǔ)條件。
精度和速度,一方面依賴人,另一方面依賴設(shè)備。盡管現(xiàn)在高密度使用一些移液槍也會(huì)引發(fā)腱鞘炎,但移液槍的發(fā)明和使用還是大為減少了誤差,提高了工作效率。
而當(dāng)時(shí)超凈工作臺(tái)里的槍不能拿出來,而且要戴手套用,則是考慮到微生物污染。現(xiàn)在做超凈工作臺(tái)里的操作,都是穿上滅過菌的衣服,在藥企等行業(yè),還要求無菌衣是無纖維脫落的材質(zhì)。但那會(huì)只有白大褂,這東西會(huì)脫落棉纖維還過于肥大,所以有時(shí)會(huì)直接用75%酒精消毒到肘部。我和師兄們?cè)?jīng)因?yàn)榫凭竞螅瑳]有晾干就靠近酒精燈操作,直接從手腕燒到肘部,直接實(shí)現(xiàn)燃燒式脫毛。
不像現(xiàn)在擁有臭氧、干霧等多種方式消毒,當(dāng)時(shí)擦拭靠消毒劑,空氣靠紫外。紫外燈這東西,最大的弊端就是消毒有死角。所以如果你的畢業(yè)項(xiàng)目是非常依賴無菌操作,那么成功率會(huì)比別的低很多。有個(gè)老師每次培養(yǎng)細(xì)胞都念念有詞,形成了獨(dú)特的開工儀式。
為了檢測超凈工作臺(tái)是否無菌,一般重要的試驗(yàn)開始前,要提前一兩天紫外消毒后關(guān)閉,然后把兩個(gè)培養(yǎng)基(當(dāng)時(shí)是用營養(yǎng)瓊脂居多)平板放里面一兩個(gè)小時(shí),而后培養(yǎng)。看下是否有菌落長出,如果有,那么必定是大量消毒劑擦拭,而后再次重復(fù)上面操作。
在很多實(shí)驗(yàn)室,為了保障無菌,頻繁使用的超凈工作臺(tái)風(fēng)機(jī)是不關(guān)的,而且使用前后都要開紫外照射。但依然無法杜絕染菌,畢竟超凈工作臺(tái)所處的環(huán)境是普通環(huán)境,不像現(xiàn)在要求的A級(jí)環(huán)境必須有B級(jí)背景環(huán)境。失去了潔凈區(qū)的大環(huán)境,完全依賴超凈工作臺(tái)和酒精燈,難度可想而知。
從玻璃制品的試驗(yàn)器材做主力,到現(xiàn)在一次性塑料耗材成為主流,逐漸換代的時(shí)間大約有十來年。這期間日新月異的變革,確實(shí)為檢驗(yàn)、科研等工作創(chuàng)造了便利條件。發(fā)展帶來了新的技術(shù),新技術(shù)的應(yīng)用帶來了新的需求,也帶來了新的問題,之前塑料耗材的使用量非常之少,而現(xiàn)在則是量的巨變。關(guān)于醫(yī)療垃圾污染和塑料廢棄物濫用的報(bào)道也屢見不鮮,這或許是當(dāng)初塑料制品發(fā)明者始料不及的。用慣了一次性耗材,再返回頭去看那些需要一遍遍手洗的器具,感覺像笑話?;蛟S幾十年后的新人,再看我們?nèi)绱艘蕾囈淮涡院牟?,也覺得是一種無知吧。
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