早在2010年nature就報(bào)道了first in class的小分子BRD4抑制劑，從此揭開(kāi)了BRD4作為熱門(mén)靶點(diǎn)的研究熱潮。但是隨著各大公司開(kāi)發(fā)的不同結(jié)構(gòu)的小分子抑制劑在臨床上腫瘤適應(yīng)癥的接連失敗，BRD4是否是一個(gè)可以成藥的靶點(diǎn)也一直引發(fā)很多討論，本文試圖對(duì)臨床在研的BRD4抑制劑進(jìn)行分析來(lái)談?wù)勗摪悬c(diǎn)。

       01

       BRDS研究背景

       Bromodomain(BRDS)是能夠特異性識(shí)別蛋白中乙?；嚢彼釟埢谋Ｊ氐鞍捉Y(jié)構(gòu)域，根據(jù)結(jié)構(gòu)和序列的相似性，61個(gè)人類溴結(jié)構(gòu)域被分為8個(gè)家族，其中的BET家族蛋白最 具代表性并包括BRD2, BRD3, BRD4, 和BRDT，BET家族溴結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)BRD4蛋白含有能夠結(jié)合組蛋白和其他蛋白的乙?；嚢彼釟埢?，在調(diào)控基因和控制細(xì)胞生長(zhǎng)方面起著重要作用，BRD4蛋白與調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄方面的大蛋白質(zhì)復(fù)合物相關(guān)，包括介體、PAFc和超級(jí)伸長(zhǎng)復(fù)合物等。BRD4的激酶活性可直接磷酸化并激活RNA聚合酶II,從而調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。

       人類許多疾病都與BRD4蛋白有著密切的聯(lián)系，如腫瘤、自體免疫性或炎癥性疾病、病毒感染等。BRD4抑制劑靶向BRD4，對(duì)其進(jìn)行抑制，在抗癌和抗炎以及多個(gè)領(lǐng)域有著極大的價(jià)值，一直在吸引各大制藥公司和科研機(jī)構(gòu)的關(guān)注。

       BRD4蛋白含有兩個(gè)亞型BD1和BD2，鑒于它們的高序列相似性，在BET家族中獲得選擇性抑制是具有挑戰(zhàn)性的，因此，泛BET抑制劑(如(+)-JQ1和iBET-151等)通過(guò)同時(shí)抑制多個(gè)溴域而被廣泛應(yīng)用于BET蛋白的功能研究。但是盡管泛BET抑制劑有效，由于其使用掩蓋了單個(gè)溴結(jié)構(gòu)域的功能，在某些情況下，會(huì)導(dǎo)致脫靶并產(chǎn)生嚴(yán)重的安全性問(wèn)題。

       02

       BRDS靶點(diǎn)前景

       接下來(lái)針對(duì)臨床在研的BRD4抑制劑，談一談該靶點(diǎn)的前景，僅代表個(gè)人看法。筆者從相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行檢索BRD4相關(guān)靶點(diǎn)的臨床在研抑制劑，搜索結(jié)果列舉如下表，剔除了一部分臨床失敗的條目。

       圖1 部分臨床在研的BRD4抑制劑

       SYHA 1801是由石藥集團(tuán)開(kāi)發(fā)的BRD4抑制劑，適應(yīng)癥為實(shí)體瘤，從公開(kāi)信息來(lái)開(kāi)，沒(méi)有找到公開(kāi)結(jié)構(gòu)，筆者經(jīng)過(guò)查詢發(fā)現(xiàn)藥明DDSU和石藥在2017年9月聯(lián)合申請(qǐng)了一篇化合物專利（WO2019056950A1），根據(jù)該專利及后續(xù)的專利布局，SYHA 1801應(yīng)該是根據(jù)TEN-010進(jìn)行改造的，鑒于羅氏開(kāi)發(fā)的TEN-010在多個(gè)適應(yīng)癥（急性髓系白血病;乳腺癌;彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤;多發(fā)性骨髓瘤;卵巢癌;固體腫瘤）幾乎全軍覆沒(méi)，筆者對(duì)石藥這款SYHA 1801持消極的態(tài)度。

       Apabetalone (RVX-208)是由Resverlogix 公司開(kāi)發(fā)的喹唑啉酮類的BRD4抑制劑，其對(duì)BD2的選擇性較BD1達(dá)到了170倍，目前處于臨床三期的適應(yīng)癥有：急性冠脈綜合征;動(dòng)脈粥樣硬化;低高密度脂蛋白膽固醇；其尚未對(duì)腫瘤方向的適應(yīng)癥進(jìn)行開(kāi)發(fā)，目前看，這一類BD2選擇性的BRD4抑制劑前景不錯(cuò)。

       INCB 057643是由Incyte公司開(kāi)發(fā)的，雖然在癌癥方向的適應(yīng)癥已經(jīng)終止，Incyte公司仍未放棄，2021年針對(duì)骨髓纖維化開(kāi)展了二期臨床實(shí)驗(yàn)。

       PLX-2853是由Plexxikon和第一三共聯(lián)合開(kāi)發(fā)的，目前處于臨床的適應(yīng)癥有婦科癌癥、血液學(xué)的惡性腫瘤；結(jié)構(gòu)尚未公開(kāi)，Plexxikon還有一個(gè)分子進(jìn)入臨床，即PLX-51107，但是其在多個(gè)適應(yīng)癥相繼失敗，目前在臨床前開(kāi)發(fā)治療移植物抗宿主病；筆者查詢Plexxikon公司申請(qǐng)的BRD4抑制劑專利，其骨架的相似性較高，PLX-2853應(yīng)該和PLX-51107的骨架差別不大，目前看其后續(xù)前景亦不容樂(lè)觀。

       CC 90010是由新基公司開(kāi)發(fā)的異喹啉酮類的小分子抑制劑，新基公司后被BMS收購(gòu)，目前在BMS的臨床管線可以查到。新基從FORMA收購(gòu)得到FT1101（結(jié)構(gòu)未披露），連同BMS自己的BMS986158，這樣BMS同時(shí)在開(kāi)發(fā)三款BRD4小分子抑制劑，足以可見(jiàn)公司對(duì)該靶點(diǎn)的重視程度。

       艾伯維的ABBV-075和Constellation公司的CPI-0610在癌癥方向的臨床都失敗了，目前在開(kāi)發(fā)骨髓纖維化的適應(yīng)癥；ABBV-075和INCB 057643都有吡咯并吡啶酮的母核，該類骨架看來(lái)在癌癥方向上走不遠(yuǎn)。

       阿斯利康的AZD 5153在淋巴瘤和實(shí)體瘤方向的臨床也以失敗告終，目前正在二期臨床聯(lián)合用藥治療骨髓纖維化。

       Boehringer Ingelheim的BI-894999是吡啶并咪唑再接一個(gè)噠嗪酮片段，目前在臨床一期的適應(yīng)癥是彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤;實(shí)體腫瘤。

       BMS-986158是由BMS開(kāi)發(fā)的第二代BET抑制劑，隨后BMS又開(kāi)發(fā)了BMS986225作為backup，相比于986158，主要通過(guò)引入F改善了透膜性、利用氘代提高了代謝穩(wěn)定性、引入了吡啶片段增加了溶解度，同時(shí)沒(méi)有對(duì)PK產(chǎn)生不利的影響。

       吉利德開(kāi)發(fā)的GS 5829是一類苯并咪唑類的小分子，目前在Clinicaltrials上查詢到的3個(gè)腫瘤適應(yīng)癥均已經(jīng)終止。

       圖3 針對(duì)耐藥BET的PROTACs

       目前，一些泛bet抑制劑正在臨床試驗(yàn)中，用于治療不同的癌癥。然而，大多數(shù)泛bet抑制劑的臨床進(jìn)展仍處于早期階段，主要集中在癌癥治療方面。

       03

       存在問(wèn)題以及突破方向

       迄今公布的臨床試驗(yàn)結(jié)果提出了幾個(gè)需要考慮的關(guān)鍵問(wèn)題。

       首先，一些抑制劑在臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出**，包括劑量限制**(DLT)。

       最常見(jiàn)的不良反應(yīng)是血小板減少、腹瀉、疲勞、嘔吐、貧血和高膽紅素血癥。一個(gè)常見(jiàn)的DLT是血小板減少，但血小板功能未受損，血小板計(jì)數(shù)下降是可逆的，停藥后1周內(nèi)可恢復(fù)。

       此外，并發(fā)癥和免疫缺陷是使用泛bet抑制劑的潛在不良反應(yīng)。BAY1238097 的I期試驗(yàn)由于嚴(yán)重的**作用而提前終止，INCB057643也是出于安全考慮而停產(chǎn)。

       第二，一些抑制劑的抗腫瘤活性比臨床前試驗(yàn)中觀察到的低得多。

       在對(duì)44例復(fù)發(fā)或難治性淋巴瘤患者進(jìn)行的CPI-0610劑量研究中，只有2例完全緩解，1例部分緩解。此外，OTX-015和IBET151，由于其對(duì)實(shí)體腫瘤的療效有限而被迫終止。泛bet抑制劑在腫瘤模型中顯示了顯著的生存優(yōu)勢(shì)，而這在耐藥細(xì)胞移植中往往被取消。

       缺乏臨床療效的主要原因可能是未能確定最可能受益于泛bet抑制劑治療的正確患者組，導(dǎo)致DLT發(fā)生前給藥無(wú)效。此外，適度的結(jié)果可能部分歸因于耐藥性的發(fā)展，降低了對(duì)泛bet抑制劑的臨床反應(yīng)。

       因此，接下來(lái)的臨床突破主要圍繞在三個(gè)方面——

       第一，尋找高選擇性的、針對(duì)BD1或BD2或BRD4的抑制劑，降低脫靶，減少副作用的發(fā)生；

       第二，從相關(guān)通路如AMPK，尋找雙靶點(diǎn)抑制劑解決耐藥問(wèn)題；

       第三，針對(duì)于BRD4的PROTAC以解決耐藥的問(wèn)題，目前尚未有針對(duì)BRD4的降解劑進(jìn)入臨床。

       參考文獻(xiàn)：

       1.Pan Tang et al. Targeting Bromodomain and Extraterminal Proteins for Drug Discovery: From Current Progress to Technological Development. J. Med. Chem. 2021, 64, 2419?2435.

       2.Yu Rao et al. PROTACs as Potential Therapeutic Agents for Cancer Drug Resistance.Biochemistry 2020, 59, 240?249.

       3.Andrew P. Degnan et al. Development of BET inhibitors as potential treatments for cancer: A search for structural diversity.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 44 (2021) 128108.

       4.樊磊 王飛 吳孝全等；CN10776508B.