ADC研發(fā)，早已內卷成了麻花。醫(yī)藥寒冬下，還有哪些研發(fā)機會？siRNA或是不錯的突破方向。

       隨著小核酸藥物成為近年來研發(fā)熱點之一，其類別ASO、siRNA、aptamer等研發(fā)方向開始發(fā)力，以品種數(shù)量來看，siRNA逐漸成為研發(fā)界新寵。

       01

       上市6款，

       臨床≥II期數(shù)十款

       與傳統(tǒng)小分子和抗體相比，siRNA關聯(lián)獨特的疾病靶點、開發(fā)成功率高、開發(fā)時間短、并可基于技術平臺進行藥物開發(fā)。

       目前，全球有100多家公司從事siRNA領域的研究，其中約30家專門從事siRNA藥物的開發(fā)。

       截至2023年，已有6種siRNA藥物獲批上市，其中5款來自于Alnylam。據Alnylam官網介紹，成立于2002年的Alnylam開發(fā)了全球首 個獲批上市的RNAi治療藥物ONPATTRO®（patisiran），后相繼開發(fā)了GIVLAARI®（givosiran）、OXLUMO®（lumasiran）、Leqvio®（inclisiran）、AMVUTTRA®（vutrisiran）等，該公司當前重點專注于遺傳疾病、心臟代謝疾病、傳染病、中樞神經系統(tǒng)和眼部疾病等適應癥領域。

       圖1 Alnylam公司公布的藥物研發(fā)管線

       圖片來源：https://www.alnylam.com/alnylam-rnai-pipeline

       另，有文獻報道，截至到2023年8月，全球有15個正在研究的siRNA藥物處于臨床2期或以上階段，適應癥主要集中于遺傳性疾病、罕見病、并向其他常見疾病拓展（如代謝性疾病、心血管疾病、乙型肝炎、癌癥等）。

       如，ALN-AGT（NCT04936035，NCT05103332）目前正在開發(fā)用于治療高血壓，并已進入II期臨床。Olpasiran（NCT05581303）旨在治療動脈粥樣硬化斑塊，目前正在進行III期臨床。

       SLN360（NCT05537571）是一種降脂siRNA，已進入II期。

       RBD1016（NCT05961098）是一種用于治療乙型肝炎的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）偶聯(lián)siRNA，將在歐洲開始II期臨床試驗。STP705和STP707由兩種靶向轉化生長因子-β1（TGF-β1）和環(huán)氧合酶-2（COX-2）的siRNA組成，并以肽納米顆粒（PNPs）的形式開發(fā)；STP705局部給藥于病變組織，用于治療原位鱗狀細胞癌（NCT04844983，2期）和基底細胞癌（NCT04669808，2期），而STP707（NCT05037149，1期）為靜脈注射給藥，用于治療多種實體瘤和纖維化性肝臟疾病，如原發(fā)性硬化性膽管炎。

       圖2 獲批上市&臨床≥II期siRNA療法

       圖片來源：Trends in Molecular Medicine,January 2024,Vol.30,No.1 https://doi.org/10.1016/j.molmed.2023.10.005

       02

       國內藥企對siRNA的青睞

       據公開信息統(tǒng)計，國內藥企在siRNA方向的產品布局，已有＞20款品種通過引進和自研的方式進行開發(fā)，最高臨床階段為臨床II期。另，在剛剛過去的2023年，就有多個品種獲得國內臨床默示許可，具體如：

       君實生物與潤佳醫(yī)藥共同研發(fā)的靶向血管生成素樣蛋白3（ANGPTL3）siRNA藥物JS401，擬用于治療高脂血癥。

       杭州舶臨醫(yī)藥科技有限公司自主研發(fā)的siRNA新藥BW-00163，擬用于治療高血壓；另一款siRNA新藥BW-00112，擬用于治療血脂異常；再一款siRNA新藥BW-20805，擬用于治療遺傳性血管性水腫（HAE）。

       圣因生物自主研發(fā)的一款靶向肝細胞PCSK9的siRNA-GalNAc結合物SGB-3403，擬用于治療高膽固醇血癥、混合型血脂異常以及動脈粥樣硬化性心血管疾病。

       正大天晴自主研發(fā)的一種靶向乙型肝炎病毒（HBV）的siRNA藥物TQA3038，擬用于治療慢性乙型肝炎。

       靖因藥業(yè)開發(fā)的一款siRNA藥物SRSD101，能特異性肝靶向PCSK9，臨床擬用于治療原發(fā)性高膽固醇血癥；另一款siRNA藥物SRSD107，臨床擬用于預防或治療血栓栓塞性疾病。

       石藥集團自主研發(fā)的一款通過偶聯(lián)GalNAc實現(xiàn)肝臟靶向遞送的siRNA藥物SYH2053，臨床擬用于治療成人原發(fā)性高膽固醇血癥或混合型血脂異常。

       大睿生物自主研發(fā)的PCSK9靶向雙鏈siRNA藥物RN0191，臨床擬用于治療成人原發(fā)性高膽固醇血癥（家族性和非家族性）或混合型血脂異常。

       03

       siRNA當前存在的

       技術痛點、解決方向

       盡管siRNA藥物研究取得了重大進展，且國內藥企對此青睞有加，但仍存在一些需要克服的關鍵挑戰(zhàn)，有文獻對此歸納為3個“E”挑戰(zhàn)（進入-Entry、逃逸-Escape、療效-Efficacy），并認為上述3點是限制siRNA臨床開發(fā)的3個關鍵問題。

       ®進入挑戰(zhàn)（有針對性的積累和細胞攝?。?/p>

       第一個挑戰(zhàn)是在靶器官/組織中實現(xiàn)siRNA的有效富集和有效內化到目標靶細胞中。

       siRNA由于分子相對較大和陰離子電荷特性，未經修飾的裸siRNA表現(xiàn)出低生物利用度，且半衰期短至幾分鐘。同時，siRNA可以被存在于血漿、組織和細胞質中的核酸酶或磷酸酶迅速降解。

       盡管siRNA可以被動地在肝臟或腫瘤組織等多孔部位積累，但將這些治療藥物輸送到優(yōu)先吸收這些分子的器官以外的身體其他部位，以及BBB的有效跨膜，仍然面臨著巨大的挑戰(zhàn)。

       ®逃逸挑戰(zhàn)（內體和溶酶體逃逸）

       第二個挑戰(zhàn)是如何實現(xiàn)有效的內體和溶酶體逃逸。雖然siRNA可以通過內吞作用進入細胞，但只有不到1%的siRNA能夠從內吞體逃逸，其中被動逃逸率小于0.01%。

       ASGPR（人去唾液酸糖蛋白受體）略不同，其肝細胞表達水平約為500000或更高，回收時間小于20分鐘。治療過程中，肝細胞細胞質中可以積累足夠的GalNAc-siRNA偶聯(lián)物，以達到治療水平；但除了肝細胞外，對于其他類型的細胞，siRNA逃逸仍然是一個未解決的問題。

       ®療效挑戰(zhàn)（藥物體內療效）

       第三個挑戰(zhàn)是需要良好的體內穩(wěn)定性、持久的效果和安全性。利用病毒載體在體內傳遞核酸存在一定的毒副作用，化學合成的載體系統(tǒng)如陽離子脂質和大多數(shù)無機納米顆粒也可能在體內誘導細胞凋亡和炎癥。

       現(xiàn)，化學修飾已被廣泛用于增強siRNA的穩(wěn)定性，減少/消除脫靶效應和免疫原性，從而提高siRNA的“療效”。通過復雜的修飾，siRNA已經成功實現(xiàn)了99%的基因沉默并在體內持續(xù)存在，可以實現(xiàn)低劑量的季度、半年甚至每年給藥。然而，修飾誘導的穩(wěn)定性和特異性增強可能會降低沉默活性或引起意想不到的不良反應。

       圖3 限制siRNA臨床開發(fā)的3個“E”挑戰(zhàn)

       圖片來源：Trends in Molecular Medicine,January 2024,Vol.30,No.1 https://doi.org/10.1016/j.molmed.2023.10.005

       針對上述3個挑戰(zhàn)，業(yè)界也正在逐點進行問題的解決，如進一步的結構修飾，這包括開發(fā)新的化學修飾單體、修飾模式和RNAi觸發(fā)結構。

       傳統(tǒng)的siRNA修飾主要包括2'-OMe、2'-F、PS，而新的修飾單體和修飾模式的發(fā)展將進一步完善siRNA的藥代動力學和安全性。如，新型單體如乙二醇核酸(GNA)、5'-(E)-乙烯基膦酸鹽[5'-(E)-VP]，新型RNAi觸發(fā)結構如sciRNAs，不對稱siRNA和二價siRNA骨架等。同時，siRNA的設計和修飾正在通過AI算法來實現(xiàn)。

       再如，開發(fā)一些獨特的遞送系統(tǒng)。雖然各種納米材料如LNPs、聚合物、無機納米顆粒和外泌體已經被開發(fā)成siRNA載體，但它們的負載能力、穩(wěn)定性、安全性和有效性仍然存在局限性。未來的基礎研究大體還是側重于優(yōu)化這些載體的理化性質，如與配體共價連接，這些配體包括小分子、脂質、多肽、抗體、糖、非編碼RNA等，并基于此進一步形成靶向。

       圖4 規(guī)避三個“E”挑戰(zhàn)的策略和方法

       圖片來源：Trends in Molecular Medicine,January 2024,Vol.30,No.1 https://doi.org/10.1016/j.molmed.2023.10.005

       04

       結語

       siRNA自首 款產品上市至今，較另一大類小核酸藥物ASO，時間不長，相對具有更大的開發(fā)空間和潛力，國內藥企也是紛紛將資源投入于此。

       但客觀講，基于該領域已形成的現(xiàn)有技術背景和現(xiàn)可以實現(xiàn)的技術特征如靶向、多途徑給藥、強效持久、低劑量、總體安全性等，國內企業(yè)目前大都處于跟進的狀態(tài)，離“質”的突破尚需時間。同時，還需要注意其他類別小核酸藥物的開發(fā)，防止形成技術方面總體被覆蓋的可能性。