中藥是中醫(yī)防病治病的物質(zhì)基礎(chǔ)，是中華民族幾千年傳統(tǒng)智慧的結(jié)晶。但是，許多基礎(chǔ)理論和關(guān)鍵科學問題的闡釋仍然使中藥備受爭議，限制著中藥的發(fā)展。因此，利用現(xiàn)代科學的思路和方法實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化是中藥發(fā)展的一個重要策略，其中中藥活性成分的篩選方法技術(shù)是中藥現(xiàn)代化的基礎(chǔ)和手段。

       隨著生物科技、化學分離技術(shù)的不斷發(fā)展，可通過多方面對中藥活性成分進行篩選，從傳統(tǒng)的篩選方法到構(gòu)建不同的篩選模型，使用先進的計算機技術(shù)篩選復雜中藥中活性成分。開發(fā)了分子識別技術(shù)、分子對接技術(shù)、高通量篩選技術(shù)及生物芯片技術(shù)等篩選方法。運用正確的篩選方法可使中藥制劑更加安全，能夠剔除致敏成分，降低有害成分，最 大程度發(fā)揮藥效。新的活性成分篩選方法可以為新藥研發(fā)提供新的候選化合物，開辟新途徑。

       1、傳統(tǒng)的成分分離及活性追蹤

       傳統(tǒng)的成分分離研究思路起源于國外的天然藥物研究。首先利用植物化學的方法對中藥中的化學組分進行提取、分離與鑒定。然后采用不同的生物學方法，并利用藥理模型(整體動物、離體器官、細胞和分子等模型) 對每一個化學成分進行生物活性篩選，最后確定有效成分，闡明中藥發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，采用該思路方法已對大部分的單味中藥的化學成分進行了系統(tǒng)的分離和相應(yīng)的生物活性研究，并取得了顯著的效果，如成功發(fā)現(xiàn)了抗瘧新藥青蒿素、治療心腦血管病的川芎嗪和治療老年癡呆病的石杉堿甲等。這種研究方法是建立在中藥藥效物質(zhì)研究的最基礎(chǔ)層面，不僅盲目性大而且忽視了中藥的系統(tǒng)性、作用的整體性以及生物體內(nèi)環(huán)境的相互影響。這種方法在應(yīng)用中經(jīng)常會出現(xiàn)以下兩個問題：一是生物活性成分或有效成分在分離純化的過程中丟失；二是會出現(xiàn)中藥化學成分越純化、活性越低的異?，F(xiàn)象。

       2、分子識別技術(shù)

       分子識別技術(shù)的原理是根據(jù)藥物小分子與生物體內(nèi)受體，包括蛋白、酶、DNA、受體等具有特異性結(jié)合的特點，將靶蛋白，酶，受體等生物大分子固定到一定的載體上，根據(jù)相互作用的強弱不同從而將不同的活性成分篩選分離出來的色譜方法。主要包括親和超濾篩選法和生物色譜法。

       親和超濾篩選法將超濾技術(shù)的高分離能力與親和作用的高選擇性有效結(jié)合，該技術(shù)能對生物特征物質(zhì)進行高通量篩選。首先將天然、合成或代謝的多組分的混合物樣品與親和性靶標混合孵育，利用親和力作用與靶受體結(jié)合成復合物，然后利用超濾方法，將結(jié)合生成的復合物與其它未結(jié)合成分分離，接著用合適的洗脫液處理超濾膜截留得到的復合物，使親和體從大分子中解吸出來，最后再利用其他分析手段初步鑒定親和配體的結(jié)構(gòu)。該技術(shù)具有實驗周期短、樣品用量少、特異性較強、靈敏度較高等優(yōu)勢。

       分子生物色譜是將靶蛋白、受體、酶等生物大分子固定到一定的載體上作為色譜的固定相，在流動相中加入相應(yīng)的中藥提取物，洗脫分離與靶標生物大分子發(fā)生特異性結(jié)合的天然藥物化學成分的色譜技術(shù)。其中以α-酸性糖蛋白和人血清白蛋白(HSA)這兩種載體蛋白為固定相的生物色譜研究較為熱門。細胞膜色譜是將細胞膜固定在一定材料載體上，保留其生命特征作為固定相，用此固定相研究藥物與膜受體相互作用的關(guān)系，特異性篩選中藥中有效的化學成分，并利用分析手段加以分析的膜色譜技術(shù)。該技術(shù)廣泛用于藥物與細胞膜受體的親和力及互作用研究，從而篩選中藥中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。

       3、分子對接技術(shù)

       分子對接技術(shù)是計算機輔助設(shè)計藥物領(lǐng)域的重要技術(shù)，不僅可以研究藥物中活性成分與靶點的相互作用，還可用來發(fā)現(xiàn)并優(yōu)化先導化合物。分子對接技術(shù)又稱為分子對接虛擬篩選技術(shù)，其設(shè)計原理是用1個或多個蛋白質(zhì)作用靶點對中藥化學成分或者天然產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫進行篩選，尋找出與靶標蛋白特異性結(jié)合的化合物，最終篩選出具有一定活性的先導化合物。分子對接技術(shù)早期的原理是“鎖-鑰模型”，即配體進入受體的方式如同鎖和鑰匙，當配體與受體結(jié)合時不發(fā)生構(gòu)象變化，受體與配體被視為剛性結(jié)構(gòu)；由于其局限性后期又提出了“誘導契合學說”，這一原理說明蛋白與底物結(jié)合并且發(fā)生構(gòu)象變化，此時的受體與配體被視為柔性結(jié)構(gòu)，該原理得到的對接結(jié)果更為準確。

       4、高通量篩選技術(shù)

       高通量篩選技術(shù)是一種以分子和細胞為載體的篩選方法，分為分子水平和細胞水平，可以從大量藥物中篩選與靶點相互作用的目標藥物。高通量篩選技術(shù)配備全自動工作站，靈敏、快速的檢測儀器和計算機控制軟件，它是以分子水平或細胞水平為基礎(chǔ)，微孔板為載體工具，通過程序調(diào)控，且高通量篩選技術(shù)每天要篩選成千上萬個化合物，從而提高了線索化合物的篩選效率，并以相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)支持整體運轉(zhuǎn)的技術(shù)體系。高通量篩選技術(shù)通過中藥與靶點之間相互作用達到篩選藥效成分的目的，根據(jù)分子間相互作用的原理建立篩選模型，從而篩選出與特定靶點特異性結(jié)合的活性成分。高通量篩選技術(shù)擁有快速、靈敏和準確的特點，該技術(shù)在基礎(chǔ)水平上可以同時篩選多種成分，發(fā)揮優(yōu)勢，降低工作效率、減少樣品用量，從而提高藥物的生物利用度。

       5、計算機虛擬技術(shù)

       利用計算機虛擬篩選技術(shù)對中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進行研究是基于各種數(shù)學算法，結(jié)合計算機強大的編程建模、數(shù)據(jù)庫構(gòu)建和搜索功能才能得以實現(xiàn)。首先將前期的大量研究成果進行分類匯總分析，然后利用計算機算法構(gòu)建不同的數(shù)據(jù)庫，比如中藥化學成分庫、中藥藥理作用庫、中藥功效庫等。與此同時不斷地結(jié)合現(xiàn)代系統(tǒng)生物學的研究成果，對數(shù)據(jù)庫進行完善和補充，從多個學科層面和角度探索中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥性理論、作用機制等相關(guān)課題。如網(wǎng)絡(luò)藥理學就是將來源于實驗與文獻的多層次多維度數(shù)據(jù)，進行整合分析，通過構(gòu)建的網(wǎng)絡(luò)，既可以在生物網(wǎng)絡(luò)的基礎(chǔ)上解析中藥作用機制，又可以在網(wǎng)絡(luò)模型上闡釋中醫(yī)藥理論。

       6、生物芯片技術(shù)

       生物芯片（bio-chip）將生物活性材料（寡聚核苷酸、DNA、多肽、抗原、抗體乃至細胞和模式動物等）以陣列形式固定于支持物的表面，可以在其上同時進行數(shù)千乃至上萬次實驗，從而達到高通量、快速篩選的目的。通常來說，生物芯片與拇指一般大，固定于其上的生物活性物質(zhì)微小，以點陣的方式排列在硅基上，很像計算機的芯片，所以它被稱為“生物芯片”。采用微電子學的并行處理和高密度集成技術(shù)，可利用軟件同時并行分析成千上萬種生物樣品，具有高通量、微型化、自動化以及檢測樣品用量少等優(yōu)點。

       中藥作為一個巨大的人類遺產(chǎn)寶庫，其藥效已經(jīng)得到了廣泛的認可和驗證。但是如何高效快速地篩選、分離出中藥中的活性成分，實現(xiàn)中藥的現(xiàn)代化，還需要現(xiàn)代技術(shù)的輔佐。隨著我國中藥現(xiàn)代化戰(zhàn)略的推進，一批臨床療效確切、安全性高的中藥正逐漸被國際認可，而中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究是制約中藥現(xiàn)代化發(fā)展的重要瓶頸，也是中藥研究領(lǐng)域的熱點和難點，因此基于中藥具有多成分、多靶點，協(xié)同作用的特點，快速、高效實現(xiàn)多個藥物活性成分篩選及鑒定技術(shù)的開發(fā)，對推進中藥現(xiàn)代化進程具有重要意義。中藥活性成分篩選技術(shù)的不斷提高，使中藥臨床療效更加明確、用藥更安全，推進了中藥的現(xiàn)代化進程。

       參考文獻

       [1]丁璇,洪戰(zhàn)英,柴逸峰.中藥活性成分的高通量篩選新技術(shù)[J].藥學實踐雜志,2015,33(03):193-197.

       [2]畢素俠,王瑩,李大鵬,戚進,余伯陽.中藥活性成分篩選方法研究進展[J].海峽藥學,2018,30(11):43-46.

       [3]許晴,李智,萬梅緒,張燕欣,李德坤,鞠愛春.中藥活性成分篩選新技術(shù)研究進展[J].藥物評價研究,2021,44(07):1541-1547.

       作者簡介：小泥沙，食品科技工作者，食品科學碩士，現(xiàn)就職于國內(nèi)某大型藥物研發(fā)公司，從事營養(yǎng)食品的開發(fā)與研究。