2018年中期，中國浙江某企業(yè)某原料藥品種被檢測出亞硝胺雜質(zhì)，進而引發(fā)了一場波及全球的監(jiān)管風暴。雖然經(jīng)過幾年波折，此事對中國國內(nèi)市場的影響已經(jīng)平靜下來，但是歐美藥政當局對此問題持續(xù)關(guān)注和強化，并沒有很多退讓的動作。近期，F(xiàn)DA又發(fā)布了針對NDSRI的指南，針對這一類新發(fā)現(xiàn)的亞硝胺雜質(zhì)提出自己新的控制策略。此文將介紹相關(guān)技術(shù)細節(jié)，希望對意圖進入美國市場的企業(yè)有所裨益。

       為了讓讀者閱讀本文時不至于太乏味，本文以問答形式來體現(xiàn)FDA對亞硝胺雜質(zhì)控制的最新要求。

       問題01-FDA在過去發(fā)布過哪些控制亞硝胺雜質(zhì)的指南？

       答復(fù)：在2020年9月，F(xiàn)DA發(fā)布《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》草案。隨后在2021年2月，F(xiàn)DA發(fā)布《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》的第一修訂版。

       問題02-FDA《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》中討論的亞硝胺雜質(zhì)和2023年8月FDA發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs) 》中討論的NDSRI有什么不同？

       答復(fù)：先介紹一下2023年FDA指南提到的NDSRI。這個概念如果翻譯成中文，就是亞硝胺類活性成分有關(guān)雜質(zhì)。從定義和指南描述可以看出，NDSRI是一類結(jié)構(gòu)和API相似，具有唯一性的亞硝胺雜質(zhì)。這類NDSRI雜質(zhì)主要在制劑中出現(xiàn)，是由API和輔料中亞硝化劑導(dǎo)致的；自然，在部分原料藥中，由于高溫流化床工藝或者氣流磨粉工藝，也會出現(xiàn)NDSRI。

       而FDA在2021年2月修訂的《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》中提到的亞硝胺雜質(zhì)是各類藥品中常見的NDMA/NDEA這一類小分子雜質(zhì)。

       問題03-FDA對小分子亞硝胺雜質(zhì)控制工作時間表是怎樣的？

       針對小分子亞硝胺雜質(zhì)的控制，F(xiàn)DA202102修訂《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》提到的時間表，是有區(qū)分的：

       ---對于已經(jīng)上市藥品，在原始指南發(fā)布的7個月內(nèi)進行風險評估，并應(yīng)在2021年3月31日之前完成評估。MAH應(yīng)該隨之盡快啟動確認測試，應(yīng)該在原始指南發(fā)布3年內(nèi)啟動確認測試和啟動相關(guān)變更；完成這些工作的截止日期是2023年10月1日。

       ---對于還沒有申報的產(chǎn)品，F(xiàn)DA建議DMF持有者和藥品MAA在申報之前啟動風險評估，并根據(jù)風險評估結(jié)果啟動確認測試。如果在申報之前沒有完成這些工作，建議在申報之后，根據(jù)需要啟動確認測試和啟動相關(guān)技術(shù)變更。

       ---對于已經(jīng)遞交申請還處于審評階段的產(chǎn)品，F(xiàn)DA建議申請人盡快啟動風險評估，并進行確認測試。如果確認測試發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)水平高于AI限度，應(yīng)該及時通知FDA并啟動變更。如果確認測試發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)水平低于AI限度但是高于定量限，應(yīng)該進行相關(guān)修訂。

       問題04-針對NDSRI這類雜質(zhì)，F(xiàn)DA建議的工作時間表是怎樣的？

       答復(fù)：

       --- 針對已經(jīng)上市藥品，制造商和申請人應(yīng)在本指南發(fā)布后3個月內(nèi)重新評估風險，建議完成日期為2023年11月1日，以此作為整體風險管理的一部分。一旦發(fā)現(xiàn)NDSRI的風險，應(yīng)立即開始使用靈敏和適當?shù)尿炞C方法進行確認測試。如果在藥品中檢測到NDSRI的水平超過了推薦的AI限度（例如根據(jù)其預(yù)測的致癌效力類別計算），那么FDA建議制造商和申請人制定控制策略和/或設(shè)計方法，將NDSRI控制在可接受的水平內(nèi)。如果確認測試顯示雜質(zhì)水平高于AI限度，F(xiàn)DA建議在2025年8月1日前提交各類變更的申請。

       ---對于還未申報的藥品，F(xiàn)DA建議申請人在提交原始申請之前對NDSRI進行風險評估，并在適當?shù)那闆r下進行確認測試。然而，如果在原始申請?zhí)峤粫r尚未進行風險評估和確認測試，風險評估和確認測試結(jié)果以及對DMF或申請的變更可以在修訂申請中提交。

       ---對于已經(jīng)提交申請還處于審評階段的藥品，MAA應(yīng)迅速進行風險評估，如果確認測試發(fā)現(xiàn)NDSRI水平高于本指南中建議的AI限度，應(yīng)通知FDA。如果檢測到NDSRI高于建議的AI限度，申請人應(yīng)酌情修改申請信息。FDA將與申請人合作，努力解決審查周期內(nèi)的問題。各項工作完成時間要符合PDUFA和GDUFA給定的時間表。

       問題05-為什么FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》沒有經(jīng)歷征集意見階段？

       答復(fù)：

       根據(jù)FDA一般工作慣例，F(xiàn)DA會先發(fā)布指南草案，征集意見結(jié)束后再轉(zhuǎn)換為定稿指南。然后，根據(jù)FDA掌握的信息，基于原料藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)，很多制劑中會含有NDSRI這類雜質(zhì)，必須給予快速應(yīng)對和處理。在本指南發(fā)布實施后，行業(yè)人士還可以繼續(xù)通過郵寄方式或者在線方式反饋技術(shù)建議。

       問題06-FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》適用于原料藥嗎？

       答復(fù)：盡管根據(jù)科學(xué)研究，確認NDSRI主要是制劑中API和輔料中亞硝化劑反應(yīng)生成，但是部分原料藥由于要經(jīng)歷高溫流化床工藝或者氣流磨粉工藝，也會出現(xiàn)NDSRI，因此這份指南適用于藥品制劑和原料藥。

       問題07- FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》準確適用范圍？

       答復(fù)：根據(jù)問題的性質(zhì)，這份指南適用于藥品，包括已批準或待批NDA或ANDA涉及的處方藥和非處方藥產(chǎn)品，以及未根據(jù)藥品申請監(jiān)管而上市的商品，包括受FDCA（即 OTC專論藥物），或以其他方式受CGMP的約束的產(chǎn)品。本指南也適用于臨床開發(fā)中的處方藥和非處方藥產(chǎn)品。此外，本指南適用于含有化學(xué)合成片段的生物制品或含有藥物成分的生物主導(dǎo)的組合產(chǎn)品，無論此類產(chǎn)品正在開發(fā)中還是已批準或正在申請BLA。本指南中的建議適用于藥品和原料藥制造商。

       問題08- FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》準確不適用于哪些藥品？

       答復(fù)：這份新指南不適用于用于晚期癌癥患者的產(chǎn)品中檢測到的NDSRI（即屬于ICH指南S9抗癌藥物非臨床評估范圍內(nèi)的藥品）。ICH S9原則、ICH Q3A（R2）雜質(zhì)指南和ICH Q3B（R2）雜質(zhì)指南可用于為這些晚期癌癥用藥產(chǎn)品設(shè)定雜質(zhì)標準。

       問題09-目前FDA針對各類亞硝胺雜質(zhì)推薦的工作流程是什么？

       答復(fù)：根據(jù)2021年2月修訂的亞硝胺指南，流程如下：（1）對其原料藥和藥品中的亞硝胺進行風險評估;（2）如果發(fā)現(xiàn)風險，則進行確認性測試;（3）報告為防止或減少已批準和待審評的NDA和ANDA中API和藥品中亞硝胺雜質(zhì)的存在而實施的變更工作。上述工作流程也適用于針對NDSRI的各項工作。

       問題10-將雜質(zhì)AI限度折算為ppm形式的公式是什么？

       答復(fù)：根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》，計算公式是：

       ppm = AI（納克 （ng））/MDD（毫克）

       其中，AI是NDSRI雜質(zhì)接受限度，MDD是藥品標簽上的日劑量。

       問題11-為什么對NDSRI雜質(zhì)確定安全限度很具有挑戰(zhàn)性？

       答復(fù)：FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》，確定NDSRIs的AI限度通常比確定小分子亞硝胺雜質(zhì)的AI限度更具挑戰(zhàn)性，主要是因為NDSRIs對于每個API都是唯一的；因此，NDSRIs通常存在有限或沒有足夠的安全數(shù)據(jù)（例如嚙齒動物致癌性數(shù)據(jù)）。FDA已經(jīng)在官網(wǎng)發(fā)布了有限數(shù)量的NDSRI的推薦AI限度，但與更常見的亞硝胺（例如亞硝胺指南中確定的那些雜質(zhì)）不同， 目前尚未確定大多數(shù)NDSRI的建議AI限度。

       問題12-確定NDSRI雜質(zhì)限度，主要依據(jù)哪些數(shù)據(jù)庫信息？

       答復(fù)：目前FDA建立NDSRI安全限度，主要依據(jù)致癌性數(shù)據(jù)可從致癌效力數(shù)據(jù)庫（CPDB）或Lhasa致癌性數(shù)據(jù)庫（LCDB）獲得。

       問題13-如果為某個NDSRI選擇替代化合物進行風險評估，主要考慮哪些技術(shù)因素？

       答復(fù)：根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》，主要考慮取代程度、空間位阻大小、電子影響、代謝激活潛力、所得代謝物的穩(wěn)定性/反應(yīng)性以及總分子量。

       問題14-有哪些常見的化合物被推薦為替代化合物？

       答復(fù)：根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》，推薦采用：NDMA、N-亞硝基哌啶（NPIP）、4-（甲基亞硝基氨基）-1-（3-吡啶基）-1-丁酮（NNK）、N-亞硝基吡 咯烷（NPYR）和N-亞硝基嗎啉（NMOR）

       問題15-采用2023年8月FDA指南中推薦的構(gòu)效關(guān)系方法來推測NDSRI的AI限度，是否適用于各類亞硝基結(jié)構(gòu)物質(zhì)？

       答復(fù)：不是。根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》，這份指南描述的預(yù)測致癌效力分類方法適用于在N-亞硝基兩側(cè)攜帶碳原子的NDSRI，其中碳不直接與雜原子雙鍵相連（即N-亞硝基酰胺，N-亞硝 基 脲，N-亞硝基胍和其他相關(guān)結(jié)構(gòu)被排除在外）。此外，預(yù)測的致癌效力分類方法不適用于N-亞硝基位于芳環(huán)內(nèi)的NDSRI（例如亞硝化吲哚）。

       問題16-如果藥品MAA或者MAH發(fā)現(xiàn)自己確定雜質(zhì)AI限度和FDA推薦的不一致，如何辦？

       答復(fù)：FDA鼓勵MAA和MAH和FDA進行充分溝通。如果MAA或者MAH發(fā)現(xiàn)新的數(shù)據(jù)和工作思路，都可以和FDA進行溝通，并提出修訂NDSRI的AI限度的建議。

       問題17-是否FDA在2023年8月發(fā)布的NDSRI指南推薦方法是唯一的方法？

       答復(fù)：不是。FDA在2023年8月發(fā)布的《Recommended Acceptable Intake Limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)》推薦的使用構(gòu)效關(guān)系預(yù)測NDSRI限度的方法是針對各類NDSRI的通用方法；如果FDA在某些特殊情況下已經(jīng)另行向制藥企業(yè)建議AI限度（例如基于化合物特異性評估或來自替代化合物的交叉分析），則需要采用這些特定情況下確定的AI限度。

       問題18-根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的NDSRI指南，NDSRI分為幾類？限度如何？

       答復(fù)：參見下表：

       說明：上面這個表格不是指南原表格，已經(jīng)進行了簡化。

       問題19-根據(jù)FDA在2023年8月發(fā)布的NDSRI指南，進行構(gòu)效關(guān)系計算的公式是怎樣的？

       答復(fù)：

       雜質(zhì)致癌風險得分=α-氫分值+失活特征分值（NDSRI中存在的特征的所有得分總和）+活化特征分值（NDSRI中存在的特征的所有得分總和）

       根據(jù)上面公式計算每個雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)，得分越高的風險越低，限度值越高；得分越低的風險越高，限度值越低。

       問題20-目前FDA對哪些API對應(yīng)的NDSRI進行了限度計算并提供信息？

       答復(fù)：FDA在如下網(wǎng)址更新了技術(shù)信息：

       https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/updated-information-recommended- acceptable-intake-limits-nitrosamine-drug-substance-related

       從上面截圖可以看出，F(xiàn)DA已經(jīng)計算了247個藥品的NDSRI限度，相關(guān)MAA/MAH可以采用上述信息。

       問題21-如果MAA/MAH擬對自己產(chǎn)品中的雜質(zhì)實施Ames試驗，F(xiàn)DA有哪些信息可以推薦?

       答復(fù)：為了讓MAA/MAH提供安全信息，網(wǎng)址如下：

       https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/updated-information-recommended-acceptable-intake-limits-nitrosamine-drug-substance-related

       如果進行Ames試驗，F(xiàn)DA建議使用OECD471指南中描述的完整測試菌株，使用預(yù)培養(yǎng)法，并將大鼠和倉鼠的S9分數(shù)以30%的濃度添加到實驗體系中。

       系列文章：《兔年談之一：歐盟關(guān)鍵法規(guī)和指南檢索應(yīng)用》、《兔年談之二：FDA指南更新計劃釋放行業(yè)監(jiān)管新信號》、《兔年談之三：中藥研發(fā)之激戰(zhàn)2023》、《兔年談之四：中國藥品標準體系的演變點滴》、《兔年談之五：燕京來文驚初夏，深夜香茗感雪風 ---也談<20230524關(guān)于加強委托生產(chǎn)藥品上市許可持有人監(jiān)管工作的通知征求意見稿>》、《兔年談之六-2025版中國藥典漸顯真容之（一）》、《兔年談之七：2025版中國藥典漸顯真容之（二）》、《兔年談之七：美國藥品短缺數(shù)據(jù)分析和展望》、《兔年談之八：中美歐三方GMP問答對比分析》、《兔年談之九：EDQM-CEP認證進入2.0時代》、《兔年談之十：NMPA加入PIC/S進度和PIC/S GMP最新變化介紹》

       作者簡介：zhulikou431，高級工程師、PDA會員、ISPE會員、ECA會員、PQRI會員、資深無菌GMP專家，在無菌工藝開發(fā)和驗證、藥品研發(fā)和注冊、CTD文件撰寫和審核、法規(guī)審計、國際認證、國際注冊、質(zhì)量體系建設(shè)與維護領(lǐng)域，以及無菌檢驗、環(huán)境監(jiān)控等領(lǐng)域皆具有較深造詣。近幾年開始著力關(guān)注制藥宏觀領(lǐng)域趨勢分析和制藥企業(yè)并購項目的風險管理工作。