無(wú)菌控制對(duì)于發(fā)酵是需要直面的問(wèn)題，對(duì)于生物實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)是管理中的重要一項(xiàng)，這關(guān)乎到實(shí)驗(yàn)效率、實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷等。下面結(jié)合個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)與理解，從布局、環(huán)境控制、操作、強(qiáng)化理解與解決偏差，談?wù)勆飳?shí)驗(yàn)室無(wú)菌控制的一些經(jīng)驗(yàn)。
一、布局
實(shí)驗(yàn)室在設(shè)計(jì)時(shí)就需要根據(jù)現(xiàn)有及將來(lái)可能的情況而充分考慮布局。合理的人流可減少可能的污染及交叉污染。分子區(qū)、發(fā)酵區(qū)與公共區(qū)應(yīng)該盡可能地分離，超凈臺(tái)最好在獨(dú)立隔離間而盡量避免放置于門口，以減少使用時(shí)外部風(fēng)的回灌可能；潔具與垃圾桶不應(yīng)該放置于上風(fēng)口；水電需一次性考慮到位，減少水的滴漏與排水堵塞，降低每次停電的影響與過(guò)多的操作；冰箱與烘箱，與滅菌鍋應(yīng)該盡量遠(yuǎn)離；試劑配置、攪拌溶解與調(diào)pH又需在臨近區(qū)域。
搖床考慮不同溫度外，還需要配備專用的與可以臨時(shí)混用的搖床；放置搖床區(qū)域應(yīng)該比較獨(dú)立，需要考慮周圍環(huán)境的排風(fēng)換氣能力與散熱效果，一般放置在通風(fēng)較好的環(huán)境下。
發(fā)酵罐配套的壓縮機(jī)的采風(fēng)口需要靠近上風(fēng)口；發(fā)酵罐的排氣不影響其他。
二、環(huán)境控制
人始終是可能的最大污染源，需從工作服的清洗、穿戴，消毒液的配置與更換，手的消毒開(kāi)始關(guān)注每一步驟。無(wú)菌操作前，得注意鞋口、袖口、領(lǐng)口與帽口鎖緊，在超凈臺(tái)操作前需等待2-3分鐘，讓氣流穩(wěn)定；操作過(guò)程中，盡量避免雙手交叉、物品之間相互觸碰，另外其他人走路時(shí)也盡量慢一些使周圍環(huán)境不因走動(dòng)速度過(guò)快而起風(fēng)；操作后及時(shí)清潔。
桌子及臺(tái)子需經(jīng)常擦拭，避免灰塵與死角；超凈臺(tái)利用前后得擦拭消毒；其他物品的擺放，一般要求是用與放都得順手，標(biāo)識(shí)后定置放置。
移液槍如不滅菌，盡量是各實(shí)驗(yàn)獨(dú)立一套，并按其要求及時(shí)維護(hù)；其他設(shè)備按要求定期維護(hù)；垃圾桶及時(shí)傾倒，活性物質(zhì)滅活處理；下水道及水池周邊無(wú)污漬沉積，并定期用次氯酸鈉或者新潔爾滅、酒精等消毒劑噴灑消毒。
三、操作
操作一定按照老師所教導(dǎo)的方法操作，前期最好是“復(fù)制式操作”，即老師如何教就如何做；最好是“目觸及式操作”，即眼睛緊盯操作，“手隨目轉(zhuǎn)”。這個(gè)過(guò)程需要“專心”地學(xué)，“細(xì)心”地練習(xí)，經(jīng)歷一個(gè)反復(fù)練習(xí)、熟能生巧直到獨(dú)立操作的過(guò)程。
滅菌鍋使用時(shí)盡量不要裝太滿，各物品裝袋子時(shí)也盡量不要裝太滿，以保障滅菌效果。特別要注意滅菌后物料擰蓋時(shí)機(jī)與物料遇冷后首次開(kāi)蓋時(shí)的操作；特別要注意不同材質(zhì)的物料滅菌后在外部降溫時(shí)的風(fēng)險(xiǎn)與操作。
四、強(qiáng)化理解
無(wú)菌控制需要提升對(duì)各方面的理解。老師為什么要這么操作？滅菌工藝為什么是這樣？滅菌前物料的包裝與滅菌后拆包裝的操作為什么是這樣？為什么要注意這些細(xì)節(jié)？何為無(wú)菌風(fēng)險(xiǎn)？結(jié)合所學(xué)知識(shí)，延展及探究環(huán)境消毒，各種菌的生長(zhǎng)習(xí)性，就開(kāi)始有系統(tǒng)化的無(wú)菌控制思維。
五、解決偏差
無(wú)菌控制是糾偏與預(yù)糾偏結(jié)合的技術(shù)，如發(fā)現(xiàn)有染菌，及時(shí)地分析出雜菌種屬及來(lái)源，針對(duì)性地分析原因與解決。解決無(wú)菌偏差可能需要更多更深更系統(tǒng)的知識(shí)，偏差出現(xiàn)后分析是什么菌，如何通過(guò)性狀或者16S檢測(cè)判定，而又如何找到確定的來(lái)源，最后如何解決與避免，這又是知識(shí)、經(jīng)驗(yàn)與能力的體現(xiàn)。
再預(yù)防性地發(fā)現(xiàn)相關(guān)問(wèn)題，如設(shè)備異響就需要做臨時(shí)性檢查；突然停水、電之后就及時(shí)系統(tǒng)檢查等等。
總之，提前考慮布局，做好強(qiáng)化環(huán)境控制，穩(wěn)定操作實(shí)踐，加強(qiáng)系統(tǒng)化理解，提升解決偏差的能力，方可直面生物實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌控制。
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